鹽酸伊立替康脂質(zhì)體的制備及體外藥劑學(xué)行為研究.pdf

1、目的： 鹽酸伊立替康是一種半合成水溶性喜樹堿衍生物。喜樹堿是1966年Wall等人從洪桐科植物喜樹的莖皮中提取得到的<'[1]>。臨床上使用喜樹堿治療胃癌、膀胱癌、白血病和結(jié)腸直腸癌等。但由于其水溶性差，難以制成適合的劑型，毒副作用比較大，除胃腸道毒性和骨髓抑制外，嚴(yán)重者還會損傷腎臟產(chǎn)生血尿，這些都使喜樹堿的應(yīng)用受到限制。鹽酸伊立替康(CPT-11)是日本第一制藥和Yakult Honsha公司于1994．年開發(fā)上市的抗腫瘤藥物

2、<'[2]>。鹽酸伊立替康水溶性好，抗腫瘤活性比喜樹堿高，毒性比喜樹堿小。它是美國FDA 40多年來，繼5-FU以后，再次批準(zhǔn)用于轉(zhuǎn)移性結(jié)、直腸癌一線治療的藥物。 鹽酸伊立替康作為治療轉(zhuǎn)移性結(jié)直腸癌的有效藥物，目前只有注射劑一種劑型，其主要的不良反應(yīng)為中性粒細(xì)胞減少癥和腹瀉。長期大量應(yīng)用難以耐受[3-4]。 脂質(zhì)體是一種定向藥物載體，屬于靶向給藥系統(tǒng)的一種新劑型。它具有類細(xì)胞結(jié)構(gòu)，進(jìn)入體內(nèi)主要被網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)吞噬而激活機(jī)體

3、的自身免疫功能，并改變被包封藥物的體內(nèi)分布、使藥物主要在肝、脾、肺和骨髓等組織器官中蓄積，從而提高藥物的治療指數(shù)、減少藥物的治療劑量和降低藥物的毒性<'[5]>。因此本研究采用鹽酸伊立替康為模型藥物，制備鹽酸伊立替康脂質(zhì)體，可減少用藥劑量，延長其在血漿中的停留時(shí)間，減慢消除，可望提高療效，降低遲發(fā)性腹瀉和中性粒細(xì)胞減少癥等毒副作用，從而擴(kuò)大鹽酸伊立替康的臨床應(yīng)用范圍。 方法： 在預(yù)實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)上初步確定鹽酸伊立替康脂質(zhì)體的

4、制備方法和處方，然后通過單因素考察初步確定影響脂質(zhì)體制備的因素。鹽酸伊立替康脂質(zhì)體的制備：對鹽酸伊立替康脂質(zhì)體的制備方法進(jìn)行研究，采用薄膜分散法、主動載藥法、乙醚注入法、逆相蒸發(fā)法四種方法制備脂質(zhì)體；采用葡聚糖凝膠柱對脂質(zhì)體與游離藥物進(jìn)行分離，測定脂質(zhì)體中鹽酸伊立替康的包封率，最終確定硫酸銨梯度法(主動載藥法)為鹽酸伊立替康脂質(zhì)體的制備方法。 以包封率和穩(wěn)定性為指標(biāo)，通過單因素考察優(yōu)化脂質(zhì)體的制備工藝，并考察類脂材料用量、藥物用

5、量、硫酸銨濃度和孵育溫度等對脂質(zhì)體的影響。在此基礎(chǔ)上，采用四因素三水平正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)對各個(gè)制備條件進(jìn)行篩選，最后確定鹽酸伊立替康脂質(zhì)體的最佳處方。 分別繪制鹽酸伊立替康脂質(zhì)體和鹽酸伊立替康溶液的體外釋放曲線，比較其體外釋藥過程，并用零級、一級、Hi2uchi和Weibull方程進(jìn)行擬合，考察相關(guān)系數(shù)。 以粒徑、外觀、顏色、滲漏率作為指標(biāo)，考察鹽酸伊立替康脂質(zhì)體的物理和化學(xué)穩(wěn)定性。 結(jié)果： 硫酸銨梯度法制備的

6、鹽酸伊立替康脂質(zhì)體包封率較高，通過正交設(shè)計(jì)確定最佳處方為磷脂400mg，膽固醇200mg，硫酸銨溶液濃度為0.2mol/L，孵育溫度為50℃，藥脂比為1：10。所制備鹽酸伊立替康脂質(zhì)體包封率為65.4％，pH值為6.15，在光鏡和透射電鏡下呈類圓形和橢圓型，平均粒徑為600nm，粒徑大小符合靶向要求。 鹽酸伊立替康脂質(zhì)體和鹽酸伊立替康溶液的體外釋放曲線：分別用零級、一級、Higuchi和Weibull方程進(jìn)行擬合，并考察相關(guān)系數(shù)

7、。鹽酸伊立替康脂質(zhì)體和溶液體外釋藥均符合一級方程，其方程及相關(guān)系數(shù)分別為Ln(1-Q)=0．03 107t-0．1227，r=0．9975Ln(1-Q)=-0．01556t-0．2266，r=0．9958。 由此可知，鹽酸伊立替康脂質(zhì)體較鹽酸伊立替康水溶液具有一定緩釋作用。 穩(wěn)定性結(jié)果顯示：脂質(zhì)體在加熱條件下不穩(wěn)定；在25℃條件下貯存1個(gè)月，包封率有所下降，脂質(zhì)體沉淀分層，而在4℃條件下貯存1個(gè)月，包封率略有下降，粒徑變

8、化不大，穩(wěn)定性較好，說明脂質(zhì)體需在冷藏條件下保存。鹽酸伊立替康脂質(zhì)體的化學(xué)穩(wěn)定性結(jié)果顯示：加入抗氧劑V<,E>后，可有效抑制磷脂氧化。將鹽酸伊立替康脂質(zhì)體混懸液制成凍干粉劑可顯著提高藥物穩(wěn)定性。 結(jié)論： 以喜樹堿類衍生物鹽酸伊立替康為模型藥物，根據(jù)藥物藥理作用特點(diǎn)設(shè)計(jì)，以卵磷脂、膽固醇為主要材料，采用硫酸銨梯度法制備脂質(zhì)體給藥系統(tǒng)，制備工藝簡單，重現(xiàn)性好，質(zhì)量穩(wěn)定，可顯著提高藥物靶向性，無免疫毒性，是一種很有前途的靶向給