甘藍(lán)型油菜多體附加系“Ni08-063”的農(nóng)藝性狀、細(xì)胞學(xué)與分子學(xué)研究.pdf

1、植物遠(yuǎn)緣雜交是作物遺傳改良的重要途徑。埃塞俄比亞芥具有黃種皮、抗裂角、抗干旱等優(yōu)異性狀，通過(guò)遠(yuǎn)緣雜交將埃芥的優(yōu)異農(nóng)藝性狀基因?qū)氲礁仕{(lán)型油菜中，選育出黃種皮、抗逆性強(qiáng)的甘藍(lán)型油菜品種是油菜育種研究的熱點(diǎn)課題。
　　 本研究在已獲得的甘藍(lán)型油菜與埃塞俄比亞芥遠(yuǎn)緣雜種衍生后代多體附加系材料“Nj08-063”的基礎(chǔ)上，通過(guò)細(xì)胞學(xué)方法、GISH技術(shù)和Southern blot等技術(shù)，對(duì)其進(jìn)行細(xì)胞遺傳和分子遺傳學(xué)的研究，探究其基因組結(jié)構(gòu)

2、、組成及其與農(nóng)藝、品質(zhì)性狀的關(guān)系，并篩選鑒定甘藍(lán)型油菜附加系材料，為油菜重要農(nóng)藝性狀的基因定位、性狀轉(zhuǎn)移和種質(zhì)創(chuàng)新提供基礎(chǔ)材料。主要研究結(jié)果如下：
　　 1.植株形態(tài)觀察和農(nóng)藝性狀考察：連續(xù)兩個(gè)世代對(duì)Nj08-063植株的形態(tài)觀察結(jié)果，群體單株間植株形態(tài)變異較大，Nj08-063群體中72.73％的植株矮化、分枝數(shù)差異大、某些植株花粉生活力差(最低39.92％-53.82％)、自交結(jié)實(shí)率低。群體單株種子間種皮顏色分離明顯，有褐色

3、、黃褐色、黃色種子；芥酸含量變異較大(0.47％-40.16％)。
　　 2.細(xì)胞學(xué)觀察結(jié)果：Nj08-063植株和Nj08-063種子根尖細(xì)胞染色體數(shù)分別在2n=34～44和2n=34～41均有分布；根尖細(xì)胞染色體平均數(shù)為2n=37.66±2.56和37.68±2.36。減數(shù)分裂中期Ⅰ(MI)染色體基本構(gòu)型為(0-4)Ⅰ+(16-23)Ⅱ+(0-2)Ⅲ和(0-8)Ⅰ+(14-24)Ⅱ+(0-4)Ⅲ+(0.1)Ⅳ；此外，還觀察到

4、大量單價(jià)染色體(21.83％)、染色體橋(1.45％)、染色體落后(4.84％)、染色體分裂周期不同步(0.39％)及不均等分離(44.04％)等現(xiàn)象。表明Nj08-063是甘藍(lán)型油菜多體附加系，在甘藍(lán)型油菜基礎(chǔ)染色體上附加了多條額外染色體。
　　 3.GISH、PCR和Southern blot分析：利用GISH、PCR和Southern blot技術(shù)對(duì)Nj08-063群體中形態(tài)特異、染色體數(shù)目異常(2n>38)的植株進(jìn)行染色

5、體組成分析?；蚪M原位雜交結(jié)果表明，在“Nj08-063”衍生后代群體植株染色體上未檢測(cè)到明顯的B組染色體雜交信號(hào)；采用Southern blot分析結(jié)果表明，雜交信號(hào)僅出現(xiàn)在含有蕓薹屬B組染色體的黑芥和埃塞俄比亞芥上，而在甘藍(lán)型油菜和“Nj08-063”衍生后代群體中并未無(wú)雜交信號(hào)，表明“Nj08-063”植株中不含有B組染色體著絲粒區(qū)域特異性的重復(fù)序列。
　　 4.上述結(jié)果表明，雖然Nj08-063植株性狀、種皮顏色和品質(zhì)性