運動病評價指標的驗證和應用.pdf

1、研究目的：
　　 運動病(motionsickness，MS)，即暈車病、暈船病、暈機病、航天病等，是由于前庭器官受到刺激而引起的中樞及自主神經系統(tǒng)功能紊亂的一種疾病，主要臨床表現(xiàn)為頭暈、惡心、嘔吐、面色蒼白、出冷汗等，若治療不及時或治療不當，會引起脫水和休克。運動病可發(fā)生于任何年齡，發(fā)病率較高，是一種具有遺傳傾向的疾病，但其確切的發(fā)病機制至今尚不清楚。建立完善的運動病評價系統(tǒng)及培育合適的運動病動物模型是目前運動病研究所面臨的重

2、要問題。我們前期研究發(fā)現(xiàn)以糞便和尿液為基礎的評價指標，可用于評價大鼠和小鼠暈反應的嚴重程度。但是，這個評價指標對于評價如累加性、變異性和習服性等運動病的特征是否合適，以及應用于篩選新型的抗運動病藥物是否有效、靈敏，還有待進一步證實。因此本研究擬進一步對小鼠給予不同模式的旋轉刺激、不同的旋轉刺激時間、破壞雙側迷路、進行習服訓練及給予不同種類的抗運動病藥物來進行一系列驗證，從而為抗運動病新藥研究中評價指標的科學選擇提供實驗依據。
　　

3、 研究方法：
　　 本課題通過下列實驗驗證了運動病評價指標，并進行了抗運動病新藥的篩選。
　　 1.旋轉方式對暈反應指數(shù)的影響
　　 旋轉方式有2種：單軸旋轉和雙軸旋轉，在旋轉時間都是40min的條件下，比較這2種方式所致的暈反應的嚴重程度。單軸旋轉，即繞著一個垂直于地球表面的垂直軸做水平勻速圓周運動，速度為360°/s；雙軸旋轉，除了繞上述的垂直軸旋轉外，還繞水平軸做上下滾動，峰速度為360°/s，角加速度為

4、20°/s2。雙軸旋轉時，以20°/s2的角加速度，順時針旋轉，從0°/s加速達到360°/s后以同樣的角加速度減速到0°/s，然后逆時針旋轉，重復上述過程，如此循環(huán)，直至40min后停止旋轉。
　　 2.旋轉模式對暈反應指數(shù)的影響
　　 根據實驗儀器的設置，旋轉模式共有5組，在相同的旋轉時間40min的條件下，比較所誘發(fā)的暈反應的嚴重程度。這5組模式是：峰速度為60°/s，角加速度為80°/s2；峰速度為120°/s，

5、角加速度為60°/s2；峰速度為180°/s，角加速度為60°/s2；峰速度為240°/s，角加速度為40°/s2：峰速度為360°/s，角加速度為20°/s2。
　　 3.旋轉時間對暈反應指數(shù)的影響
　　 根據前面的實驗結果，我們選擇了峰速度240°/s，角加速度40°/s2的旋轉模式，旋轉時間分別為10min，20min，40min，60min。旋轉時，以40°/s2的角加速度，順時針旋轉，從0°/s加速達到240°

6、/s后以同樣的角加速度減速到0°/s，然后逆時針旋轉，重復上述過程，整個過程歷時12s，如此循環(huán)。在4組不同的旋轉時間的條件下，比較旋轉時間長短對暈反應嚴重程度的影響。
　　 4.習服性對暈反應指數(shù)的影響
　　 將14只小鼠每天下午2點給予旋轉刺激，旋轉模式為峰速度240°/s，角加速度40°/s2，時間為40min，連續(xù)15天，考察暈反應指數(shù)的變化情況。
　　 5.雙側迷路破壞對暈反應指數(shù)的影響
　　

7、對照組鼓室內注射生理鹽水，給藥組用鼓室內注射慶大霉素這種化學法破壞雙側迷路，考察雙側迷路破壞前后暈反應指數(shù)的變化情況。
　　 6.抗運動病藥物對暈反應指數(shù)的影響
　　 目前常用的治療運動病的藥物有4大類：抗膽堿藥、擬交感藥、抗組胺藥和鈣通道阻滯劑，我們分別選取了其中的代表藥物東莨菪堿、哌甲酯、苯海拉明和尼莫地平。腹腔注射給藥，比較運動病評價指標與這些藥物藥效是否一致。
　　 7.運動病評價指標的應用
　　

8、 應用運動病評價指標，在7個抗運動病新藥中篩選出可能有效的藥物。結合自主活動實驗和爬桿實驗這2個評價指標，進一步評價這些藥物的藥理學效應。應用運動病評價指標評價腹腔給藥和側腦室給藥后東莨菪醇的藥效。
　　 結果：
　　 1.在相同旋轉時間的條件下，與單軸旋轉相比，雙軸旋轉所致小鼠的暈反應指數(shù)較高(5.14±1.37vs3.06±1.07)。
　　 2.在相同旋轉時間的條件下，與其它旋轉模式相比，峰速度240°/s

9、，角加速度40°/s2所致小鼠的暈反應指數(shù)最高(7.05±3.22)，明顯高于峰速度60°/s，角加速度80°/s2(2.66±1.09)，峰速度120°/s，角加速度60°/s2(3.12±1.61)以及峰速度180°/s，角加速度600/s2(4.01±2.05)。
　　 3.在相同旋轉模式的條件下，與其它旋轉時間相比，旋轉40min所致小鼠的暈反應指數(shù)最高(4.85±1.26)，明顯高于旋轉10min(3.08±0.92)

10、。
　　 4.在連續(xù)旋轉15天的過程中，暈反應指數(shù)先有輕度的升高，然后逐漸下降，從第11天開始，穩(wěn)定在4左右。
　　 5.HE染色的圖片顯示，給予慶大霉素的小鼠迷路破壞完全，造模成功。與給藥前相比，給予生理鹽水對照組的小鼠暈反應指數(shù)，沒有顯著性差異(5.43±2.27vs4.67±1.92)；給予慶大霉素后，小鼠的暈反應指數(shù)出現(xiàn)下降，并且有顯著性差異(2.00±0.98vs.4.9±1.48)。
　　 6.與給藥

11、前相比，溶劑對照組的暈反應指數(shù)前后沒有差異；給予抗運動病藥物的4組，小鼠的暈反應指數(shù)都出現(xiàn)了不同程度的下降，其中，東莨菪堿組下降的最多，下降的百分比為56.7％。
　　 7.運用運動病評價指標，從7個新型抗運動病藥物中篩選出sdfky5和sdfky6這2個可能有效的藥物。
　　 8.運用自主活動實驗和爬桿實驗，進一步評價sdfky5和sdfky6這2個新型的抗運動病藥物的藥理學效應，發(fā)現(xiàn)自主活動實驗這個評價指標不夠靈敏和

12、準確。這2個藥物組的爬桿時間與東莨菪堿組相比，出現(xiàn)了不同程度的升高；sdfky6組的爬桿時間長于sdfky5組，但這2個藥物組間無顯著性差異。
　　 9.將sdfky6的2種同分異構體拆分構型進行藥效評價，與空白對照組相比，它們的暈反應指數(shù)有明顯的下降，下降的百分比為57.5％和56.9％。sdfky6-down組的爬桿時間沒有出現(xiàn)下降，反而有輕度的上升；sdfky6-up組的爬桿時間有顯著性下降，下降的百分比為81.5％。表明

13、，sdfky6-down的中樞抑制作用較小。
　　 10.與溶劑對照組相比，腹腔給藥后，東莨菪醇組的暈反應指數(shù)沒有明顯改變；側腦室給藥后，暈反應指數(shù)也沒有明顯改變。說明東莨菪醇可能不具有抗運動病的作用。
　　 結論：
　　 1、暈反應指數(shù)這個運動病評價指標穩(wěn)定而且靈敏，可以很好的評價小鼠運動病的嚴重程度。
　　 2、結合爬桿實驗，從7個新型抗運動病藥物中篩選出2個可能有效的藥物，并進一步篩選出名為sdfk