鹿茸草中苯乙醇苷類化學(xué)成分的心肌保護(hù)作用研究.pdf

1、目的：探討鹿茸草中苯乙醇苷類化學(xué)成分的心肌保護(hù)作用。
　　方法：體外采用DPPH法檢測苯乙醇苷類化學(xué)成分清除自由基的能力；采用Na2S2O4致H9c2大鼠心肌細(xì)胞缺氧缺糖實(shí)驗(yàn)考察苯乙醇苷類化學(xué)成分對心肌細(xì)胞存活率的影響；采用H2O2致H9c2大鼠心肌細(xì)胞氧化應(yīng)激實(shí)驗(yàn)考察苯乙醇苷類化學(xué)成分對心肌細(xì)胞存活率、心肌細(xì)胞形態(tài)及培養(yǎng)液中乳酸脫氫酶(LDH)活性、心肌細(xì)胞丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性的影響。體內(nèi)采用垂體后

2、葉素(pituitrin, Pit)舌下靜脈注射方法，制備大鼠心肌缺血模型，記錄各時(shí)間點(diǎn)大鼠心電圖變化情況；采用異丙腎上腺素(Isoproterenol, Iso)致大鼠心肌缺血模型，記錄各時(shí)間點(diǎn)大鼠心電圖變化情況，光鏡觀察心肌組織病理學(xué)改變，測定血清中LDH的活性；采用結(jié)扎冠狀動(dòng)脈左前降支的方法，制備大鼠心肌缺血模型，測定血清中LDH、磷酸肌酸激酶(CK)和SOD的活性，MDA和谷胱甘肽(GSH)的含量，TTC染色測定大鼠心肌梗死面積

3、。
　　結(jié)果：在體外，苯乙醇苷提取物(TPG)(15.625-500μg/ml)顯著提高DPPH自由基的清除率(14.61±0.76%-92.79±0.54%)；Na2S2O4(4 mM)處理心肌細(xì)胞6 h后，細(xì)胞存活率為(62.71±2.42%)， TPG(18.75-600μg/ml)能明顯提高心肌細(xì)胞存活率(64.60±1.91%-82.46±2.22%)；H2O2(200μM)處理心肌細(xì)胞24 h后，細(xì)胞存活率為(62.4

4、8±0.79%)，形態(tài)學(xué)觀察發(fā)現(xiàn)，細(xì)胞出現(xiàn)偽足回縮，細(xì)胞體積變小，壞死脫落等現(xiàn)象，生化指標(biāo)檢測表明，細(xì)胞培養(yǎng)液中LDH活性增高，細(xì)胞內(nèi)SOD活性降低、MDA的生成增多，而 TPG(18.75-600μg/ml)可以明顯提高細(xì)胞存活率(64.01±1.76%-86.73±3.62%)，TPG(25,100,400μg/ml)可以劑量依賴性的改善受損的細(xì)胞形態(tài)、降低培養(yǎng)液中LDH的活性、減少細(xì)胞MDA的生成、增加細(xì)胞SOD的活性。在體內(nèi)，P

5、it可以引起T波的異常抬高，TPG(45,90,180 mg/kg)能夠不同程度地抑制T波的改變；Iso可引起T波的異常抬高，大鼠心肌組織出現(xiàn)纖維斷裂、變性壞死，壞死處心肌細(xì)胞肌漿溶解，局部有炎性細(xì)胞浸潤等現(xiàn)象，血清中LDH活性升高， TPG(45,90,180 mg/kg)能夠不同程度地抑制T波的改變，對Iso所引起的心肌組織的病變有所改善，降低血清中LDH活性；大鼠經(jīng)冠狀動(dòng)脈結(jié)扎致心肌缺血24 h后，血清中LDH、CK的活性、MDA

6、含量增加以及SOD活性、GSH含量降低，TPG(45,90,180 mg/kg)能降低心肌梗死面積和降低血液中LDH、CK的活性、MDA的含量，增加SOD的活性、GSH的含量。
　　在體外實(shí)驗(yàn)中，acteoside、torenoside B、isoacteoside、savatiside A四個(gè)單體在濃度為3.125-100μg/ml時(shí)， DPPH的清除率分別為2.23±1.87%-90.34±0.13%、4.23±1.24%-8

7、2.77±2.65%、1.77±0.99%-85.05±2.45%、1.23±0.54%-51.39±1.92%；與Na2S2O4損傷心肌細(xì)胞相比四個(gè)單體可分別提高細(xì)胞的存活率到62.67±1.23%-73.15±3.14%、62.28±1.17%-74.43±1.61%、62.09±2.13%-75.63±1.77%、61.31±1.84%-72.43±1.81%；與H2O2損傷心肌細(xì)胞相比四個(gè)單體可分別提高細(xì)胞的存活率到63.82±