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1、目的:通過測(cè)定高同型半胱氨酸血癥(HHcy)大鼠血清基質(zhì)金屬蛋白酶-9(MMP-9)及基質(zhì)金屬蛋白酶組織型抑制劑-1(TIMP-1)的表達(dá),觀察補(bǔ)充葉酸、維生素B12(VitB12)對(duì)高蛋氨酸喂飼所引起HHcy及動(dòng)脈粥樣硬化(As)的影響,探討HHcy致As的發(fā)病機(jī)制。
方法:30只Wistar雄性大鼠隨機(jī)分為對(duì)照組,蛋氨酸組及干預(yù)組。對(duì)照組給予普通飼料;蛋氨酸組普通飼料中添加2%蛋氨酸喂養(yǎng),同時(shí)以上兩組每日均給予2ml生
2、理鹽水灌胃;干預(yù)組普通飼料中添加2%蛋氨酸喂養(yǎng),同時(shí)每日給予葉酸0.5mg,VitB1225ug溶于2ml水灌胃,實(shí)驗(yàn)期為8周。采用ELISA檢測(cè)血清同型半胱氨酸(Hcy),MMP-9和TIMP-1。用HE染色法對(duì)大鼠頸總動(dòng)脈進(jìn)行病理學(xué)檢查。
結(jié)果:(1)與對(duì)照組血清Hcy(11.63±4.36umol/L)比較,干預(yù)組Hcy(16.21±4.41 umol/L)和蛋氨酸組Hcy(20.57±4.34 umol/L)血清濃
3、度均明顯升高,P<0.05,與干預(yù)組相比,蛋氨酸組血清Hcy明顯升高,P<0.05。(2)與對(duì)照組血清MMP-9(4.63±0.82ng/ml)比較,干預(yù)組MMP-9(5.72±0.68 ng/ml)、蛋氨酸組MMP-9(6.59±1.04 ng/ml)血清濃度均升高,P<0.05,與干預(yù)組相比,蛋氨酸組血清MMP-9明顯升高,P<0.05。(3)與對(duì)照組血清TIMP-1(1179.53±243.76pg/ml)比較,干預(yù)組TIMP-1
4、(1438.83±185.63 pg/ml)、蛋氨酸組TIMP-1(1640.73±184.40 pg/ml)血清濃度明顯升高,P均<0.05,與干預(yù)組相比,蛋氨酸組血清TIMP-1升高,P<0.05。(4)在對(duì)照組(r=0.825,P<0.01)、干預(yù)組(r=0.963,P<0.01)及蛋氨酸組(r=0.860,P<0.01)中Hcy與MMP-9呈正相關(guān);在干預(yù)組(r=0.950,P<0.01)和蛋氨酸組(r=0.547,P<0.01
5、)中Hcy與TIMP-1呈正相關(guān),而在對(duì)照組(r=0.255,P>0.05)中Hcy與TIMP-1之間不存在相關(guān)性。(5)鏡下觀察蛋氨酸組頸總動(dòng)脈中膜平滑肌細(xì)胞增生排列紊亂,彈力纖維融合。與對(duì)照組相比,干預(yù)組頸總動(dòng)脈血管壁未見明顯異常。
結(jié)論:HHcy可使MMP-9及TIMP-1的表達(dá)增加,并破壞MMP-9與TIMP-1之間的平衡,促使細(xì)胞外基質(zhì)(ECM)降解與重分布,致血管壁重塑,可能是HHcy致As的機(jī)制之一。葉酸和V
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