白屈菜紅堿對高糖培養(yǎng)的乳鼠心肌細胞形態(tài)和功能的影響.pdf

1、糖尿病心肌病是糖尿病最常見的慢性并發(fā)癥之一，其病理改變主要表現(xiàn)在心肌細胞的肥大、變性、灶性壞死，間質有不溶性膠原蛋白積聚、纖維化，臨床表現(xiàn)早期以心臟舒張功能不全為主，晚期以收縮功能不全為主。關于糖尿病心肌發(fā)病機制的研究，主要集中于心肌細胞的代謝、鈣離子轉運以及氧自由基異常等。有關細胞內信號傳導和細胞功能調節(jié)在糖尿病的研究越來越受到重視，其發(fā)病的機制中，二脂酰甘油.蛋白激酶C(DAG-PKC)途徑過度激活起著樞紐作用。PKC作為第二信使的

2、靶蛋白，對心肌細胞的形態(tài)以及舒縮功能起著重要調節(jié)作用。高血糖可以通過DAG-PKC途徑引起細胞膜的損傷，抑制Na+-K+-ATP酶和鈣泵的活性，引起細胞內鈣超載，從而導致從而導致心臟收縮以及舒張功能減退，最終導致心力衰竭。PKC的表達增加以及活性增強可以激活調節(jié)原癌基因c-fos. c-jun等的表達導致心室肌肥大，間質纖維化及左心室功能減退。本實驗以高糖培養(yǎng)的乳鼠心肌細胞為模型，通過測定心肌細胞直徑、搏動頻率以及PKC-α、PKC-β

3、2、PKC-α的活性(P-PKC-α)、PKC-β2的活性(P-PKC-β2)、NF-kB和c-fos的表達水平，研究PKC抑制劑白屈菜紅堿(chelerythrine)在糖尿病心肌中的心肌保護作用，并探討PKC信號傳導通路在糖尿病心肌病發(fā)病機制中的作用。
　　 目的：探討蛋白激酶C抑制劑白屈菜紅堿對高糖培養(yǎng)的乳鼠心肌細胞形態(tài)和功能的影響，以及蛋白激酶C(Protein Kinase C，PKC)α、β2，核因子(Nuclear

4、 factor，NF)-kB，c-fos的表達水平及活性的變化。
　　 方法：建立乳鼠心肌細胞培養(yǎng)模型，隨機分成低糖(5mmol/L)、高糖(25.5mmol/L)和高糖(25.5mmol/L)+不同濃度白屈菜紅堿(1μmol/L，8μmol/L)組，分別觀察各組心肌細胞搏動情況，測定心肌細胞直徑，并應用Westem blot檢測心肌細胞PKC-α、PKC-β2、p-PKC-α、p-PKC-β2、NF-kB和c-fos的表達水平

5、。
　　 結果：高糖組心肌細胞搏動頻率、細胞直徑以及PKC-α、PKC-β2、p-PKC-α、p-PKC-β2、NF-kB和c-fos的表達水平高于低糖培養(yǎng)組，差異有統(tǒng)計學意義；加入不同濃度的PKC抑制劑白屈菜紅堿后能夠使高糖組心肌細胞搏動頻率、細胞直徑以及PKC-α、PKC-β2、p-PKC-α、p-PKC-β2、NF-KB和c-fos的表達水平均降低，并呈現(xiàn)濃度依賴性。
　　 結論：白屈菜紅堿能夠抑制高糖誘導的乳鼠心