丙型病毒性肝炎聯(lián)合治療藥物相互作用及肝靶向利巴韋林的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、第一部分:丙型病毒性肝炎聯(lián)合治療藥物相互作用的實(shí)驗(yàn)研究
　　1.目的
　　本研究通過考察抗炎保肝藥物水飛薊素、甘草酸二銨、苦參素或雙環(huán)醇與利巴韋林(RBV)同時給藥,對大鼠口服RBV毒副作用及藥代動力學(xué)的影響,為臨床HCV聯(lián)合治療提供依據(jù)。
　　2.方法
　　2.1用MTT法測定RBV對HepG2的毒性以及不同保肝藥物對其細(xì)胞毒性的影響。
　　2.2將四種抗炎保肝藥物分別與高劑量(180mg/kg)或低劑量

2、(60mg/kg)的RBV同時給藥,連續(xù)10天或14天,測定其對大鼠體重增長、血常規(guī)及生化學(xué)指標(biāo)的影響。
　　2.3以同位素標(biāo)記的 RBV作為內(nèi)標(biāo)的液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜(LC-MS/MS)法測定 RBV單獨(dú)給藥及其與保肝藥物聯(lián)合給藥時大鼠血漿中RBV及其代謝產(chǎn)物的濃度,考察抗炎保肝藥物對RBV藥代動力學(xué)的影響。
　　3.結(jié)果
　　3.1水飛薊素在30μM濃度下即顯示出對 RBV細(xì)胞毒性的保護(hù)作用,保護(hù)率為101.14％,1

3、00μM的保護(hù)率為215.05%。
　　3.2高劑量利巴韋林重復(fù)給藥導(dǎo)致大鼠死亡,體重增長減慢,WBC、RBC、HGB下降和轉(zhuǎn)氨酶升高等血常規(guī)及生化指標(biāo)異常。四種抗炎保肝藥物均能顯著降低高劑量RBV所致的動物死亡數(shù),拮抗RBV所致的血小板升高;水飛薊素和雙環(huán)醇能夠顯著升高RBV所致的WBC降低,苦參素能夠顯著升高RBV所致的HGB降低,水飛薊素能夠顯著升高RBV所致的HCT降低;在生化指標(biāo)方面,甘草酸二銨對RBV所致的ALT的升高

4、具有顯著的抑制作用,雙環(huán)醇和苦參素對RBV所致的AST的升高具有顯著的抑制作用;四種保肝藥物對其它生化指標(biāo)沒有顯著影響。低劑量利巴韋林重復(fù)給藥導(dǎo)致大鼠體重增長減慢,但是對血常規(guī)和生化指標(biāo)均無顯著影響。甘草酸二銨和苦參素與低劑量RBV聯(lián)合用藥,能夠顯著加重RBV對大鼠體重增長的抑制;水飛薊素和雙環(huán)醇能夠顯著拮抗RBV對雌性大鼠體重增長的抑制作用,對雄性大鼠作用不顯著。甘草酸二銨與RBV合用,血小板計數(shù)和PCT均顯著升高;對于雌性大鼠,苦參

5、素與RBV合用,能夠顯著升高RBV所致的TP降低;水飛薊素和苦參素與RBV合用,能夠顯著降低雄性大鼠的肌酐水平。
　　3.3建立了以同位素標(biāo)記的RBV作為內(nèi)標(biāo)的LC-MS/MS檢測大鼠血液中RBV及其代謝產(chǎn)物濃度的方法,有效克服了內(nèi)源性物質(zhì)的干擾,靈敏度可達(dá)到10ng/ml;藥代動力學(xué)研究結(jié)果表明水飛薊素和雙環(huán)醇與RBV合用后,RBV的藥-時曲線下面積(AUC)和最大血藥濃度(Cmax)均顯著低于 RBV單獨(dú)給藥。甘草酸二銨和水飛

6、薊素與 RBV合用,大鼠血漿中RBV代謝產(chǎn)物的AUC和Cmax顯著低于RBV單獨(dú)給藥。
　　4.結(jié)論
　　水飛薊素能夠拮抗RBV的細(xì)胞毒性,四種抗炎保肝藥物均能降低高劑量 RBV所致的大鼠死亡率,并能部分改善血常規(guī)和生化指標(biāo);可見抗炎保肝藥物能夠降低高劑量RBV重復(fù)給藥所致的毒副作用。低劑量RBV重復(fù)給藥,對大鼠體重增長也有顯著影響,但是與正常組相比,RBV單用或與保肝藥物合用,對血常規(guī)及生化指標(biāo)均無顯著影響,表明其沒有系統(tǒng)

7、毒副作用;推測對體重的影響可能與藥物的胃腸道副作用影響了大鼠對食物的攝取、吸收和消化。
　　在藥代動力學(xué)方面,水飛薊素和雙環(huán)醇能夠顯著降低 RBV的 AUC和 Cmax,可能與抑制RBV的吸收或促進(jìn)RBV在胃腸道的代謝有關(guān);二者與RBV合用,有可能降低RBV的療效。因此,該類藥物與RBV聯(lián)合用藥的合理性,特別是其對利巴韋林抗HCV療效的影響需要進(jìn)一步的研究確認(rèn)。
　　第二部分:以膽酸為載體的肝靶向利巴韋林的實(shí)驗(yàn)研究
　

8、　1.目的
　　本研究通過考察以膽酸為載體的肝靶向RBV偶合物大鼠灌胃給藥的生物利用度,以發(fā)現(xiàn)口服生物利用度較高的靶向偶合物。
　　2.方法
　　2.1靶向偶合物和RBV經(jīng)口給藥,于給藥后不同時間采血,以LC-MS/MS法測定RBV血藥濃度,計算主要的藥代動力學(xué)參數(shù)。
　　2.2靶向偶合物和膽酸同時經(jīng)口給藥,于給藥后不同時間采血,以LC-MS/MS法測定RBV血藥濃度,計算主要的藥代動力學(xué)參數(shù)。
　　3.結(jié)

9、果
　　3.1靶向偶合物RBV-Leu-CA和RBV-Ile-CA口服給藥后血漿中RBV的Cmax顯著低于RBV,但是Tmax及T1/2顯著大于RBV,因此其AUC與RBV相當(dāng);靶向偶合物RBV-Leu-CA和RBV-Ile-CA的藥-時曲線表現(xiàn)為雙峰。
　　3.2膽酸與RBV-Leu-CA同時給藥,導(dǎo)致血漿中RBV的Cmax及AUC均顯著降低,分別只有RBV-Leu-CA單獨(dú)給藥的24%和26%。
　　4.結(jié)論