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文檔簡介
1、石斛為傳統(tǒng)名貴中藥,具有養(yǎng)陰清熱,益胃生津的功效,在臨床上及中藥復(fù)方被廣泛使用。其主要含有生物堿類、聯(lián)芐類、菲類、氨基酸類、倍半萜類、多糖類等化學(xué)成分。聯(lián)芐類具有抗腫瘤、抗氧化、抗血管新生、抑制NO生成等多樣的生物活性,為石斛的活性成分之一。
查閱文獻尚未有關(guān)于聯(lián)芐類化合物提取和純化工藝的研究報道,故本課題確定以疊鞘石斛中聯(lián)芐類化合物為研究對象,對其含量測定、提取工藝、分離純化、抗氧化作用進行系統(tǒng)研究,以期為進一步開發(fā)抗氧化活
2、性新制劑奠定基礎(chǔ)。
研究內(nèi)容和結(jié)果如下:
首先,建立聯(lián)芐類化合物的含量測定方法。以石斛酚為對照品,采用紫外-可見分光光度法和HPLC測定聯(lián)芐類化合物的總量和石斛酚的含量。繪制聯(lián)芐類化合物和石斛酚的標(biāo)準(zhǔn)曲線,其回歸方程分別為A=0.0153C+0.0054,r=0.9999;Y=813.17X+13.084,r=0.9998,確立定量檢測方法。
其次,對疊鞘石斛中聯(lián)芐類化合物的提取工藝進行研究。以聯(lián)芐類化合物
3、的提取率、石斛酚的提取率為指標(biāo),對疊鞘石斛中聯(lián)芐類化合物的回流提取工藝進行單因素考察。在單因素試驗基礎(chǔ)上,進行主要因素設(shè)計L9(34)正交試驗,確定最佳提取條件:乙醇濃度70%,料液比1g:12ml,每次提取2h,提取3次。
再次,對聯(lián)芐類化合物的提物進行分離純化工藝研究。以靜態(tài)飽和吸附率、解吸率為指標(biāo),通過靜態(tài)吸附-解吸試驗,對X-5、HPD-300、D-101、AB-8、S-8型五種大孔樹脂進行篩選。選定 HPD-300型
4、大孔樹脂用于聯(lián)芐類化合物的分離純化。對吸附性能和解吸性能進行考察,確定最佳純化工藝:上樣濃度0.4g(生藥材)/ml,上樣流速0.5ml/min,上樣量3BV,用水和70%乙醇各10BV以1.0ml/min的流速洗脫,收集70%乙醇洗脫部位。純化后聯(lián)芐類化合物純度達(dá)67.07%,較純化前提高了4.25倍;純化后石斛酚純度達(dá)0.224%,較純化前提高了4.92倍。
最后,以Vc為對照,通過清除AAPH?、清除DPPH?、抑制?O
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