晚期NSCLC預(yù)后分子指標(biāo)的探索：血清miRNA表達(dá)特征及其與組織表達(dá)的相關(guān)性分析.pdf

1、目的：研究晚期非小細(xì)胞肺癌患者血清microRNAs表達(dá)水平與臨床預(yù)后的關(guān)系，并分析組織microRNAs與血清microRNAs相對表達(dá)量的相關(guān)性。體外檢測相關(guān)microRNAs細(xì)胞毒性及對細(xì)胞侵襲轉(zhuǎn)移能力的影響，為靶向于目標(biāo)miRNAs的臨床治療提供實驗室依據(jù)。
　　方法：將68例晚期NSCLC患者血清隨機(jī)分組為訓(xùn)練集（34例）和驗證集（34例）。通過對已證實的可手術(shù)的非小細(xì)胞肺癌預(yù)后相關(guān)的組織miRNAs及血清miRNAs在

2、晚期NSCLC患者的血清中行qRT-PCR檢測，行單因素Cox回歸分析及ROC曲線分析血清miRNAs與晚期NSCLC患者PFS的關(guān)系，建立風(fēng)險公式，并行交叉驗證，繪制Kaplan-Meier曲線并行Log-rank檢驗。Pearson法在配對的組織和血清中行相關(guān)miRNAs表達(dá)量的相關(guān)性分析。MTT法檢測相關(guān)miRNAs對H358及PC9細(xì)胞系的增殖抑制作用；細(xì)胞劃痕實驗和Transwell實驗檢測相關(guān)miRNAs對H358及PC9細(xì)

3、胞系的遷移侵襲能力的影響。
　　結(jié)果：對訓(xùn)練集標(biāo)本行單因素Cox回歸分析顯示hsa-mir-1、hsa-mir-30d-5p、hsa-miR-221-3p、hsa-miR-486-5p與晚期 NSCLC患者的PFS相關(guān)，風(fēng)險分?jǐn)?shù)=(-0.918×miR-1表達(dá)水平)+(1.336×miR-30d表達(dá)水平)+(0.864×miR-221表達(dá)水平)+(-0.712× miR-486表達(dá)水平)，中位PFS高風(fēng)險組vs低風(fēng)險組為85天vs

4、228天，P＜0.001。ROC曲線下面積為0.877，臨界值為0.518，靈敏度為0.941，特異度為0.706。中位PFS在驗證集中高風(fēng)險組vs低風(fēng)險組為85天vs151天，P=0.0029，在總體標(biāo)本中為85天vs176天，P＜0.001。多因素Cox回歸分析示：吸煙狀態(tài)（P=0.037）和風(fēng)險分?jǐn)?shù)（P＜0.001）與患者PFS相關(guān)。在24例配對的組織中檢測miR-1、miR-30d、miR-221、miR-486相對表達(dá)量，行P

5、earson相關(guān)性分析，示miR-221（P=0.001）、miR-486（P=0.005）的血清和組織表達(dá)量呈正相關(guān)，miR-30d（P=0.082）血清和組織表達(dá)量無相關(guān)。體外實驗中，上調(diào)miR-221或下調(diào)miR-486可增加肺癌細(xì)胞系增殖、侵襲、轉(zhuǎn)移能力，下調(diào)miR-221或上調(diào)miR-486降低肺癌細(xì)胞系增殖能力，對侵襲及轉(zhuǎn)移能力的影響無統(tǒng)計學(xué)差異。
　　結(jié)論：hsa-mir-1、hsa-mir-30d-5p、hsa-m