Apelin-13對(duì)大鼠離體胸主動(dòng)脈環(huán)的舒張作用及機(jī)制.pdf

1、目的：探討新近發(fā)現(xiàn)的小分子活性肽Apelin對(duì)大鼠離體胸主動(dòng)脈環(huán)的舒張作用，以及研究Apelin舒張血管的細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路機(jī)制，另外再探討Apelin對(duì)腎性高血壓模型大鼠離體胸主動(dòng)脈環(huán)的舒張作用的意義。 方法：①清潔級(jí)雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠27只，體重150～180g，隨機(jī)分為對(duì)照組和兩腎一夾(2K1C)高血壓大鼠模型組。飼養(yǎng)8周后，戊巴比妥鈉(35mg/kg，i.p.)麻醉，測定平均頸動(dòng)脈壓(mCAP)，

2、同時(shí)測定左心重(左心室加室間隔)與體重比值(LVM/BW及右腎與左腎比值(RK/LK)。②血管環(huán)制備:左頸總動(dòng)脈插管放血處死動(dòng)物，迅速取出胸主動(dòng)脈，置于通以95％O2+5％CO2混合氣體的K-H液中，小心去除周圍結(jié)締組織后將血管剪成約3～4mm寬的血管環(huán)。③采用累計(jì)加藥法，檢測Apelin-13對(duì)去甲腎上腺素(Norepinephrine，NE)預(yù)收縮內(nèi)皮完整的胸主動(dòng)脈環(huán)及去內(nèi)皮后的胸主動(dòng)脈環(huán)張力的變化；及分別觀察用L-N-硝基精氨酸甲

3、酯(L-N(G)-nitroargininemethylester，L-NAME)和尼群地平(Nitrendipine)孵育后，Apelin-13對(duì)去甲腎上腺素(NE)預(yù)收縮的胸主動(dòng)脈環(huán)張力的變化。 結(jié)果：①與對(duì)照組相比：模型組mCAP高50.38％(P＜0.01)，LVM/BW高32.11％(P＜0.01)，RK/LK高51.02％。②Apelin-13對(duì)大鼠離體肺主動(dòng)脈環(huán)有舒張效應(yīng)，Apelin-13呈濃度依賴性舒張對(duì)照組及

4、模型組的離體主動(dòng)脈環(huán)。③NO合酶抑制劑L-NAME減弱了Apelin-13對(duì)大鼠離體胸主動(dòng)脈環(huán)的舒張作用。大鼠離體胸主動(dòng)脈環(huán)在反復(fù)洗去前面藥物待血管環(huán)張力回至基線后，用L-NAME(10μmol·L-1)孵育30分鐘，然后再加入10-11～10-7mol·L-1濃度Apelin-13，血管環(huán)舒張幅度降低，與不預(yù)先用L-NAME孵育相比，Emax(舒張血管最大效應(yīng)，即舒張效能，反應(yīng)血管活性物質(zhì)收縮血管的內(nèi)在活性)顯著降低，對(duì)照組Emax降

5、低30.12％(P＜0.05)，模型組Emax降低38.35％(P＜0.01)；EC50(半數(shù)有效濃度，與血管活性物質(zhì)對(duì)血管的親和力大小相關(guān)，反應(yīng)藥物效價(jià)強(qiáng)度，取負(fù)對(duì)數(shù)值)與未用L-NAME孵育相比顯著增高：對(duì)照組增加870.9％(P＜0.01)，模型組增加86.35％(P＜0.05)。④Apelin-13舒張2K1C高血壓模型大鼠離體胸主動(dòng)脈環(huán)效應(yīng)增強(qiáng)(P＜0.05)。⑤Ca2+通道阻滯劑Nitrendipine能夠減弱Apelin-

6、13對(duì)大鼠離體胸主動(dòng)脈環(huán)的舒張作用。用Nitrendipine孵育30分鐘，然后再加入各種濃度Apelin-13，血管環(huán)舒張幅度降低，與不預(yù)先用Nitrendipine孵育相比，Emax顯著降低，對(duì)照組Emax降低28.38％(P＜0.05)，模型組Emax降低33.48％(P＜0.01)；EC50與未用Nitrendipine孵育相比顯著增高：對(duì)照組增加370.45％(P＜0.01)，模型組增加455.45％(P＜0.01)。⑥Ape

7、lin-13對(duì)大鼠離體胸主動(dòng)脈環(huán)去內(nèi)皮后的舒張作用顯著減弱。大鼠離體胸主動(dòng)脈環(huán)去內(nèi)皮后再加入10-11～10-7mol·L-1濃度Apelin-13，血管環(huán)舒張幅度降低，與內(nèi)皮完整的大鼠離體胸主動(dòng)脈環(huán)相比，Emax顯著降低：對(duì)照組Emax降低42.29％(P＜0.05)，模型組Emax降低38.07％(P＜0.01)；EC50顯著增高：對(duì)照組增加370.45％(P＜0.05)，模型組增加248.63％(P＜0.05)。 結(jié)論：(

8、1)Apelin-13是大鼠離體胸主動(dòng)脈環(huán)的有效血管舒張劑。(2)NO合酶抑制劑降低Apelin-13對(duì)胸主動(dòng)脈的舒張作用，表明NO/NOS系統(tǒng)調(diào)節(jié)Apelin-13對(duì)大鼠離體胸主動(dòng)脈環(huán)的舒張作用。(3)細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路鈣離子通道部份介導(dǎo)Apelin-13對(duì)大鼠離體胸主動(dòng)脈環(huán)的舒張作用。(4)Apelin-13對(duì)去內(nèi)皮的胸主動(dòng)脈環(huán)的舒張作用降低，表明Apelin-13對(duì)去大鼠離體胸主動(dòng)脈環(huán)的舒張作用依賴于內(nèi)皮的完整性。(5)對(duì)于取自2K