冠脈內(nèi)壓力和多普勒血流測(cè)定評(píng)價(jià)冠脈內(nèi)應(yīng)用山莨菪堿對(duì)豬缺血-再灌注無(wú)復(fù)流心肌微循環(huán)影響的系列研究.pdf

1、本研究的內(nèi)容分為以下四個(gè)部分： 第一部分冠脈內(nèi)壓力和多普勒血流測(cè)定評(píng)價(jià)豬缺血/再灌注心肌微循環(huán)功能障礙的研究 目的：本研究旨在應(yīng)用與人類(lèi)心血管生物學(xué)特性更為接近的小型豬作為模型動(dòng)物，通過(guò)選擇性球囊擴(kuò)張阻斷冠狀動(dòng)脈前降支(LAD)血流,嗣后恢復(fù)血流灌注的方法，造成擬似急性心肌梗死缺血/再灌注損傷模型，應(yīng)用冠脈內(nèi)壓力和多普勒血流同步測(cè)定方法，評(píng)價(jià)豬缺血/再灌注心肌微循環(huán)功能的變化特征。 方法：8頭3～5個(gè)月齡的約克型

2、豬，采用自身對(duì)照的方法。在全麻和無(wú)菌條件下，采用非開(kāi)胸方法，Seldinger法從左、右側(cè)深股動(dòng)脈途徑置入6F動(dòng)脈鞘，以4F冠脈造影管，(內(nèi)徑0.97mm)行冠狀動(dòng)脈造影。6F導(dǎo)引導(dǎo)管超選LAD，經(jīng)指引導(dǎo)管分別送入壓力導(dǎo)絲和多普勒導(dǎo)絲，應(yīng)用壓力及血流測(cè)量?jī)x器進(jìn)行冠脈口及遠(yuǎn)端壓力和血流速度測(cè)定。根據(jù)LAD直徑選擇相應(yīng)大小球囊，缺血預(yù)適應(yīng)后持續(xù)閉塞左前降支45min，后撤出球囊，恢復(fù)冠脈血流灌注，缺血/再灌注制模成功。分別記錄基礎(chǔ)狀態(tài)、冠脈

3、再灌注即刻、30分鐘和60分鐘冠脈內(nèi)壓力階差和血流頻譜變化，獲取靜息和最大充血狀態(tài)下主動(dòng)脈壓力(Pa)、冠脈遠(yuǎn)端壓力(Pd)、平均峰值流速(average peak velocity,APV)，冠脈微血管阻力(MR)，同時(shí)獲取FFR、CFR參數(shù)。同時(shí)于基礎(chǔ)狀態(tài)、再灌注30min、60min、120min、180min分別從冠脈內(nèi)取血測(cè)定心肌壞死標(biāo)記物CK-MB、Tn，應(yīng)用5F四腔溫敏球囊漂浮導(dǎo)管測(cè)量肺毛細(xì)血管楔嵌壓(PCWP)，心輸出量

4、(CO)，經(jīng)左側(cè)股動(dòng)脈途徑4Fpigtail連續(xù)監(jiān)測(cè)左室收縮壓(INSP)、左室舒張末期壓力(LVEDP)、十二導(dǎo)聯(lián)同步記錄心電圖(ECG)等參數(shù)。最大充血狀態(tài)由冠脈指引導(dǎo)管向冠脈內(nèi)注射罌粟堿后獲得。以血壓-心率指數(shù)(PRI)來(lái)反映制模前后心肌耗氧量的變化。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后即刻切取左心室前壁缺血區(qū)、正常區(qū)及兩者交界區(qū)心肌組織各6塊行光鏡病理學(xué)檢查。 小結(jié)：選擇性球囊高壓充盈擴(kuò)張阻斷LAD血流然后釋放球囊的方法，可以造成急性心肌梗死缺血

5、/再灌注損傷模型，具有直觀、簡(jiǎn)便、重復(fù)性好、低創(chuàng)傷性、閉胸、成功率高等優(yōu)點(diǎn)；冠脈內(nèi)壓力和多普勒血流兩者結(jié)合，同步測(cè)定是目前客觀，可靠評(píng)價(jià)冠脈缺血/再灌注后心肌組織微循環(huán)功能的方法；缺血/再灌注心肌微循環(huán)功能表現(xiàn)為靜息血流速度增快，冠脈阻力減低，最大充血時(shí)血流速度減低，阻力增加，冠脈血流儲(chǔ)備減低，再灌注心肌耗氧量減少。 第二部分豬急性心肌梗死后無(wú)復(fù)流心肌微循環(huán)冠脈內(nèi)壓力和多普勒血流特征 目的：通過(guò)選擇性球囊高壓充盈擴(kuò)張阻斷

6、LAD血流后，冠脈內(nèi)注入無(wú)菌復(fù)合微血栓懸液的方法，造成擬似AMI再灌注后no-reflow模型，應(yīng)用冠脈內(nèi)壓力和多普勒血流同步測(cè)定，評(píng)價(jià)豬AMI再灌注后的no-reflow心肌微循環(huán)功能的變化特征。 方法：12頭約克型豬，采用自身對(duì)照的方法，應(yīng)用4F JL3.5、JR4.0冠脈造影導(dǎo)管分別行左、右冠脈造影。6F指引導(dǎo)管超選LAD，分別送入壓力導(dǎo)絲和多普勒導(dǎo)絲，球囊擴(kuò)張堵塞冠脈45min，撤除球囊間歇注入無(wú)菌復(fù)合微血栓懸液，應(yīng)用可

7、量化的TIMI血流計(jì)幀數(shù)(TIMI frame count，TFC)、心肌組織灌注分級(jí)(TIMI myocardial perfusion grade，TMPG)，評(píng)價(jià)心肌組織灌注水平，以TIMI血流=2級(jí)或TFC>36.2幀、TMPG=1級(jí)作為AMI-no reflow模型成功標(biāo)準(zhǔn)。應(yīng)用壓力及血流測(cè)量?jī)x器進(jìn)行冠脈口及遠(yuǎn)端壓力和血流速度測(cè)定，分別評(píng)價(jià)記錄無(wú)復(fù)流前后靜息和最大充血狀態(tài)下Pa、Pd、APV，MR，同時(shí)獲取FFR、CFR參數(shù)。

8、同時(shí)應(yīng)用4F Pigtail導(dǎo)管連續(xù)監(jiān)測(cè)LVEDP、LVSP以及左室內(nèi)壓上升和下降最大速率(the peak of left ventricular pressure risefall，±dp/dtmax)；應(yīng)用5F四腔溫敏球囊漂浮導(dǎo)管至肺動(dòng)脈測(cè)量PCWP，熱稀釋法測(cè)心輸出量(cardiac output，co)；監(jiān)測(cè)心電圖的變化，并于基礎(chǔ)狀態(tài)、無(wú)復(fù)流30min、60min、120min、180min，冠脈內(nèi)抽取血液標(biāo)本，測(cè)定CK-MB

9、、cTn I。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后心肌組織取材行光鏡病理學(xué)檢查。 小結(jié)：采用選擇性球囊擴(kuò)張阻斷LAD血流及恢復(fù)血流灌注后冠脈內(nèi)注射無(wú)菌復(fù)合微血栓懸液方法制作no reflow模型，具有直觀、簡(jiǎn)便、重復(fù)性好、低創(chuàng)傷性、閉胸、成功率高等優(yōu)點(diǎn)，為心肌微循環(huán)障礙的研究提供了較好的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型；冠脈內(nèi)壓力和多普勒血流兩者結(jié)合同步測(cè)定，能夠直接、客觀地評(píng)價(jià)no reflow冠脈微循環(huán)功能狀態(tài)，表現(xiàn)為冠脈血流儲(chǔ)備分?jǐn)?shù)正常，靜息和最大充血狀態(tài)下血流速度減

10、慢，冠脈阻力增加，冠脈血流儲(chǔ)備減低。 第三部分冠脈內(nèi)分次注射山莨菪堿對(duì)豬急性心肌梗死后無(wú)復(fù)流心肌微循環(huán)影響及冠脈內(nèi)壓力和多普勒血流評(píng)價(jià) 目的：本研究在前期實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)上，應(yīng)用冠脈內(nèi)壓力導(dǎo)絲和多普勒導(dǎo)絲同步測(cè)定，評(píng)價(jià)冠脈內(nèi)分次注入山莨菪堿對(duì)AMI-no reflow心肌微循環(huán)的影響，為臨床應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 方法：9頭4±1個(gè)月齡的約克豬，采用前期方法成功制備AMI-noreflow模型，隨機(jī)分為Saline對(duì)照組4

11、頭，Anisodamine組5頭。兩組即刻冠脈內(nèi)分3次分別給予生理鹽水5 ml/次、山莨菪堿200Qug/次冠脈內(nèi)注射，每次間隔5分鐘，即刻、5分鐘和10分鐘分三次行CAG，應(yīng)用TFC和QCA測(cè)量系統(tǒng)分別對(duì)兩組冠狀動(dòng)脈內(nèi)給藥后不同時(shí)間點(diǎn)的TFC和TMPG進(jìn)行定量分析比較。經(jīng)指引導(dǎo)管分別送入壓力導(dǎo)絲和多普勒導(dǎo)絲，同步評(píng)價(jià)記錄兩組用藥前后靜息和最大充血狀態(tài)下Pa、Pd、APV、MR，并獲取FFR和CFR參數(shù)。應(yīng)用5F四腔溫敏球囊漂浮導(dǎo)管測(cè)量

12、no reflow形成后即刻、用藥后即刻、5分鐘、10分鐘后PCWP的變化，熱稀釋法測(cè)量CO。采用4F pigtail于用藥前和用藥后即刻、5分鐘、10分鐘監(jiān)測(cè)LVSP、LVEDP。 小結(jié)：冠脈內(nèi)應(yīng)用山莨菪堿可明顯增加靜息及最大充血狀態(tài)下無(wú)復(fù)流冠脈平均峰值血流速度，降低靜息及最大充血狀態(tài)無(wú)復(fù)流冠脈微循環(huán)阻力，增加冠脈血流儲(chǔ)備，迅速改善微循環(huán)障礙，改善心肌組織灌注。 第四部分冠脈內(nèi)預(yù)先注射山莨菪堿對(duì)豬缺血/再灌注心肌微循環(huán)

13、保護(hù)作用的研究 目的：在建立球囊擴(kuò)張選擇性阻斷LDA再恢復(fù)血流灌注約克豬在體急性心肌梗死再灌注模型基礎(chǔ)上，通過(guò)預(yù)先冠脈內(nèi)注射山莨菪堿，應(yīng)用冠脈內(nèi)壓力和多普勒血流同步測(cè)定技術(shù)，評(píng)價(jià)冠脈內(nèi)直接注射山莨菪堿對(duì)豬缺血/再灌注心肌的保護(hù)作用。 方法：10頭約克型豬隨機(jī)分為2組：山莨菪堿組(Anisodamine組，5頭)，制備模型前冠脈內(nèi)分次給予山莨菪堿；生理鹽水組(Saline組，5頭)，先予冠脈內(nèi)注射等量生理鹽水。6F導(dǎo)引導(dǎo)管

14、超選LAD，經(jīng)指引導(dǎo)管分別送入壓力導(dǎo)絲和多普勒導(dǎo)絲，制備缺血/再灌注損傷模型。應(yīng)用壓力及血流測(cè)量?jī)x器進(jìn)行冠脈口及遠(yuǎn)端壓力和血流速度測(cè)定。球囊閉塞左前降支(LAD)45分鐘造成心肌缺血，撤除球囊恢復(fù)冠脈血流再灌注；分別記錄兩組制模前后基礎(chǔ)狀態(tài)、冠脈再灌注即刻、30分鐘和60分鐘冠脈壓力和血流頻譜。獲取兩組靜息和最大充血狀態(tài)下Pa、Pd、APV、MR等參數(shù)，同時(shí)獲取FFR、CFR參數(shù)值。同時(shí)于基礎(chǔ)狀態(tài)、再灌注30min、60min、120m