溴苯腈對小鼠肝組織能量代謝的影響及巰基化合物的干預.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的: 1.探討溴苯腈對小鼠離體肝組織線粒體呼吸鏈復合物Ⅰ~Ⅳ活性的影響。 2.建立溴苯腈急性中毒模型,觀察溴苯腈對小鼠肝組織能量代謝的影響,并探巰基化合物二巰丙磺鈉(Na-DMPS)、N-乙酰-L-半胱氨酸(NAC)對其的干預。 方法: 1.差速離心法分離提取ICR小鼠肝組織線粒體,隨機分成正常對照組與溴苯腈染毒組,每組6個樣本,染毒組線粒體懸浮液加入終濃度為130 mg/L的97%溴苯腈原藥,兩組均于

2、30℃培養(yǎng)箱內孵育0.5 h后,分光光度法測定肝組織離體線粒體呼吸鏈酶復合物Ⅰ~Ⅳ活性。 2.ICR小鼠40只,每組8只,隨機分成正常對照組(A組)、溴苯腈急性中毒組(B組)、Na-DMPS組(C組)、NAC組(D組)與NAC聯(lián)用Na-DMPS(E組)組,用反相高效液相色譜(RP-HPLC)法測定各組小鼠肝組織腺苷酸ATP、ADP、AMP含量,并計算總腺苷酸(TAN)及細胞能荷(EC)值;電鏡觀察各組肝細胞線粒體超顯微結構改變。

3、 3.用SPSS13.0統(tǒng)計學軟件進行分析,計量資料以均數士標準差(x±S)表示,多組間差異比較采用單因素方差分析,兩組間差異比較采用t檢驗,P<0.05為差異有顯著性意義。 結果: 1.肝組織線粒體懸液體外溴苯腈染毒后,線粒體呼吸鏈復合物Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ活性較正常對照組明顯降低(P<0.05),呼吸鏈復合物Ⅱ活性有升高趨勢,但差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。 2.與A組比較,B組小鼠肝組織ATP、TAN含量

4、和EC水平均明顯降低(P<0.05),AMP含量均較A組升高(P<0.05)。 3.與B組比較,藥物干預組(C、D、E組)ATP含量、EC水平均明顯升高(P<0.05),AMP含量均明顯下降(P<0.05),E組TAN含量較B組明顯升高(P<0.05),C、D組TAN含量有升高趨勢,但差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05);兩藥單用組(C組與D組)比較,各指標差異均無統(tǒng)計學意義(P>0.05);兩藥聯(lián)用組(E組)與C、D組比較,EC水

5、平較C組升高(P<0.05),較D組略高,但差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05),ATP、TAN含量有升高趨勢,AMP含量有降低趨勢,但差異均無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。 4.B組肝細胞線粒體明顯腫脹,線粒體嵴斷裂,數量減少,甚至空泡化;藥物干預組(C、D、E組)肝細胞線粒體病變均較B組明顯減輕,表現為散在的肝細胞線粒體輕度腫脹。 結論: 1.小鼠肝組織離體線粒體經溴苯腈染毒后,線粒體呼吸鏈復合物Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ活性降低

6、,可能為溴苯腈急性中毒所致能量代謝障礙機制之一。 2.小鼠溴苯腈急性中毒導致肝組織能量代謝障礙,可能為溴苯腈急性中毒肝組織損傷毒理機制之一。 3.巰基化合物Na-DMPS、NAC單用及聯(lián)用均可改善小鼠溴苯腈急性中毒所致的肝組織能量代謝障礙,對肝組織有較好的保護作用,以兩者聯(lián)用效果最佳。 4.溴苯腈染毒后,小鼠肝細胞線粒體損傷較明顯,經巰基化合物Na-DMPS、NAC單用及聯(lián)用干預后,線粒體病變明顯減輕,可能與其改

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