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1、目前,深凍骨已商品化,免疫排斥反應(yīng)罕見發(fā)生,故該實驗以凍干松質(zhì)骨作為基質(zhì)材料、轉(zhuǎn)染有血管內(nèi)皮細胞生長因子(VEGF)的骨髓基質(zhì)干細胞為種子細胞,這樣既保持了骨組織優(yōu)良的空間結(jié)構(gòu),又提供了種子細胞和血管化的刺激因子.希望能為骨缺損及缺血性骨病治療提供實驗和理論依據(jù).1.真核表達載體pcDNA<,3>/hVEGF<,165>的構(gòu)建目的:構(gòu)建一高效的真核表達載體,為下一步試驗作準備.方法:將PT<,7>Blue/hVEGF<,165>質(zhì)粒酶切
2、獲得hVEGF<,165>基因片段,構(gòu)建pcDNA<,3>/hVEGF<,165>真核表達載體,鑒定,擴增并純化.結(jié)論:成功構(gòu)建出pcDNA<,3>/hVEGF<,165>真核表達載體.2.VEGF在兔BMSC內(nèi)的表達及其對BMSC的影響目的:構(gòu)建血管內(nèi)皮細胞生長因子pcDNA<,3>/hVEGF<,165>真核表達載體,并用脂質(zhì)體法轉(zhuǎn)染骨髓基質(zhì)干細胞,觀察血管內(nèi)皮細胞生長因子轉(zhuǎn)染后對骨髓基質(zhì)干細胞的生長、轉(zhuǎn)化的影響.結(jié)論:轉(zhuǎn)染pcDN
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