丙戊酸鈉對女性甾體生成系統(tǒng)影響的初步研究.pdf

1、目的：通過豬的卵泡內膜細胞、正常女性及PCOS患者卵巢顆粒細胞原代培養(yǎng)體系，研究丙戊酸鈉(VPA)對卵泡內膜細胞睪酮生成和對細胞色素P45017α羥化酶(CYP17)、膽固醇側鏈裂解酶(P450scc)和類固醇激素急性調節(jié)蛋白(StAR)mRNA的影響；以及研究VPA對顆粒細胞激素生成及膽固醇側鏈裂解酶(P450scc)、芳香化酶(P450arom)和類固醇激素急性調節(jié)蛋白(StAR)mRNA的影響。探討VPA誘導女性多囊卵巢綜合征的發(fā)

2、病機制，論證化合物對女性排卵障礙產生影響的可能機理。 方法：分別采用豬的卵泡內膜細胞、正常女性和PCOS患者卵巢顆粒細胞進行體外原代培養(yǎng)，并給予不同濃度的VPA(0mg/L、100mg/L和250mg/L)處理，48h后收集培養(yǎng)液，采用ELISA法檢測豬卵泡內膜細胞的睪酮的水平，采用熒光實時RT-PCR(TaqMan.assay)方法檢測豬卵泡內膜細胞中CYP17、P450scc和StARmRNA表達。采用放射免疫方法測定正常婦

3、女和多囊卵巢綜合癥患者卵巢顆粒細胞生成孕酮及雌二醇的水平，采用實時定量PCR方法測定以上顆粒細胞中P450scc、P450arom和StARmRNA的表達。 結果：VPA刺激了豬卵泡內膜細胞睪酮分泌水平的升高(P＜0.05)，且CYP17(P＜0.01)、P450scc(P＜0.01)和StAR(P＜0.01)mRNA表達增加。VPA刺激了正常女性顆粒細胞孕酮的分泌(P＜0.05)及芳香化酶mRNA表達的增加(P＜0.05)，但

4、雌二醇分泌下降(P＜0.05)。VPA刺激PCOS女性顆粒細胞孕酮(P＜0.05)雌二醇(P＜0.05)的分泌和P450sccmRNA表達的增加(P＜0.05)。StARmRNA的表達在兩種顆粒細胞均沒有顯著性差異。 結論： VPA可直接作用于卵泡內膜細胞，改變CYP17、P450scc和StARmRNA表達，引起雄激素的分泌增高。VPA可以引起PCOS患者顆粒細胞P450scc表達的增加，這與該綜合征特征性的睪酮和雌二