局部注射維生素D對Wistar鼠牙齒移動(dòng)后新骨生成影響的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、保持牙齒穩(wěn)定是正畸過程中必不可少的一個(gè)部分，并且直接影響治療的成敗。矯正后的牙列穩(wěn)固在新位置，達(dá)到新的結(jié)構(gòu)、功能平衡，是一個(gè)漫長的過程，主要因?yàn)殄e(cuò)牙合矯正后仍長時(shí)間潛在許多的不穩(wěn)定因素，其中牙槽骨改建未完成是主要原因之一。對于正畸醫(yī)生而言，在不影響療效的前提下如果能縮短保持過程，減少患者治療痛苦是我們始終追求的目標(biāo)。探討如何使用生物化學(xué)因子促進(jìn)牙齒移動(dòng)后的骨生成，增強(qiáng)牙列穩(wěn)固性具有重要的臨床意義。此類研究國內(nèi)外還鮮有報(bào)道。

2、1，25(OH)<,2>D<,3>與骨代謝關(guān)系密切。研究表明：成骨細(xì)胞有對1，25(OH)<,2>D<,3>強(qiáng)吸引力的受體。1，25(OH)<,2>D<,3>在骨新陳代謝時(shí)能影響合成代謝，調(diào)節(jié)骨生成與礦化。體外研究已經(jīng)揭示1，25(OH)<,2>D<,3>能促進(jìn)成骨細(xì)胞擴(kuò)增和I型膠原蛋白酶，堿性磷酸酶，骨鈣素的生成。有報(bào)道不斷在體內(nèi)注入低劑量1，25(OH)<,2>D<,3>13天，骨小梁和皮質(zhì)骨均大量增加。牙齒移動(dòng)后外力作用減小，牙周

3、組織重建，成骨細(xì)胞誘導(dǎo)骨生成。因此，可推測1，25(OH)<,2>D<,3>在牙齒移動(dòng)后骨生成過程中發(fā)揮有效作用。 本實(shí)驗(yàn)擬通過在Wistar鼠上頜構(gòu)建牙齒移動(dòng)模型，在牙齒保持階段分別局部注射1，25(OH)<,2>D<,3>和PBS，從組織形態(tài)學(xué)方面研究1，25(OH)<,2>D<,3>對骨生成的影響，為臨床正畸局部使用生物化學(xué)因子縮短保持時(shí)間提供可供參考的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 材料和方法 1．維生素D對牙齒移動(dòng)后新

4、骨生成的作用 選擇7周雄性健康Wistar鼠32只，體重180-200g，隨機(jī)分2組(A、B)，每組16只。A組，牙齒移動(dòng)后注射1,25(OH)<,2>D,,3>；B組，牙齒移動(dòng)后注射PBSA組與B組分別于上頜左側(cè)第一磨牙與左上中切牙之間放加力裝置，加力裝置由0.20mm的不銹鋼結(jié)扎絲和鎳鈦螺旋拉簧組成，使用50g啟動(dòng)力使牙齒移動(dòng)，10天后用塑膠固定加力裝置和結(jié)扎絲進(jìn)行機(jī)械保持，同時(shí)于左上頜第一磨牙腭側(cè)粘膜下分別注射上述藥物，每

5、次1,25(OH)<,2>D<,3>注射量為濃度10<'-10>mol／L 20μl，每隔三天注射一次。A為實(shí)驗(yàn)組，B為對照組。2組中各有一半動(dòng)物于保持第7天處死，另一半保持第14天處死，取上頜骨為標(biāo)本行HE染色，測定左上頜第一磨牙根分叉近遠(yuǎn)中側(cè)骨礦化沉積率(MAR)、成骨細(xì)胞表面(Ob.S／BS)、破骨細(xì)胞表面(Oc.S／B S)等參數(shù)。四環(huán)素，鈣黃綠素?zé)晒怆p標(biāo)記觀察新骨生成的情況。對各組大鼠的進(jìn)食量做詳細(xì)記錄。 2．維生素D

6、對移動(dòng)牙齒后回復(fù)距離影響 選擇7周雄性健康Wistar鼠16只，體重180-200g，隨機(jī)分兩組(AR、BR)，實(shí)驗(yàn)過程分別同第一部分的A組和B組，AR組局部注射1,25(OH)<,2>D<,3>，BR組局部注射PBS，所有動(dòng)物于保持14天拆除裝置，取模測量左側(cè)上頜第一磨牙近中舌溝點(diǎn)與同側(cè)上頜第三磨牙近中舌溝點(diǎn)間的距離。以上測量均由同一人進(jìn)行3次，取均值，一周后再次測量，前后兩次差值即為牙齒回復(fù)距離。 1．維生素D對

7、牙齒移動(dòng)后新骨生成的作用 組織形態(tài)學(xué)分析顯示：保持第7天，A組近遠(yuǎn)中側(cè)的成骨細(xì)胞表面分別為23.5±9.5和21.8±9.0，B組兩側(cè)成骨細(xì)胞表面為14.6±3.7和12.0±6.9，兩者存在顯著性差異，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。牙齒移動(dòng)后重復(fù)使用1,25(OH)<,2>D<,3>提高近遠(yuǎn)中側(cè)成骨細(xì)胞表面。 保持第14天，A組近中側(cè)成骨細(xì)胞表面為19.8±3.7，骨礦化沉積率為3.8±O.6，B組近中側(cè)成骨細(xì)胞表面為

8、12.1±5.4，骨礦化沉積率為2.8±0.6，兩組相比P＜0.05。A組與B組近中側(cè)骨形成率相比P＜0.05。1，25(0H)<,2>D<,3>提高牙齒移動(dòng)后近中側(cè)成骨細(xì)胞表面、骨礦化沉積率、骨形成率。破骨細(xì)胞計(jì)數(shù)無顯著性差異(P＞O.05)。在大鼠的食量統(tǒng)計(jì)中我們發(fā)現(xiàn)，實(shí)驗(yàn)組和對照組鼠糧的食用量基本相同，不存在顯著性的差異。 熒光雙色(黃綠)骨標(biāo)記顯示保持第14天，A組近中側(cè)有大量新骨生成且明顯多于B組。HE染色顯示保持14

9、天近中側(cè)，成骨細(xì)胞成片排列，數(shù)量較多，骨面覆蓋的呈腥紅色的類骨質(zhì)較多，新骨沉積A組明顯多于B組。 2.維生素D對移動(dòng)牙齒回復(fù)距離影響AR組牙齒移動(dòng)后回復(fù)距離平均為0.05士0.01mm，BR組牙齒移動(dòng)后回復(fù)距離平均為0.36士O.12mm，兩者有顯著性差異(P＜O.05)。 結(jié)論 1.局部應(yīng)用1,25(OH)<,2>D<,3>能促進(jìn)牙齒移動(dòng)后骨生成。本實(shí)驗(yàn)1,25(OH)<,2>D<,3>在使用的過程中不會(huì)出現(xiàn)影