脊髓和背根神經(jīng)節(jié)酸敏感離子通道在大鼠骨癌痛中的作用.pdf

1、本文從以下兩方面進行了闡述。
　　第一部分骨癌痛大鼠脊髓和背根神經(jīng)節(jié)中ASICs表達的變化。
　　目的：觀察骨癌痛大鼠脊髓和背根神經(jīng)節(jié)(dorsal root ganglia，DRG)中酸敏感離子通道(acid-sensing ion channels，ASICs)表達的變化，探討其在大鼠骨癌痛中的作用。
　　方法：雌性SD大鼠(200±50g)，隨機分為3組(n=20):空白對照組（C組）、假手術(shù)組（S組）、骨癌痛組

2、（B組）。采用Walker-256乳腺癌細胞構(gòu)建大鼠脛骨癌痛模型。B組在左脛骨上端注射5μl Walker-256細胞;S組在左脛骨上端注射5μl熱滅活的Walker-256細胞;C組不予任何處理。于術(shù)前1d、術(shù)后1d、3d、5d、7d、9d、11d、14d、21d測定各組大鼠機械性縮足閾值(mechanical withdrawalthreshold，MWT)和熱縮足反射潛伏期(thermal withdrawal latency，T

3、WL);于術(shù)后7d、14d、21d取脊髓和DRG標本，Western blot法分別檢測脊髓中ASIC1a、ASIC2a、ASIC2b和DRG中ASIC1b、ASIC3通道蛋白的表達變化情況。
　　結(jié)果：(1) MWT:與C組比較，B組造模術(shù)后第5d、7d、9d、11d、14d、21d的MWT值降低(P＜0.05);與術(shù)前基礎(chǔ)值比較，B組造模術(shù)后第5d、7d、9d、11d、14d、21d的MWT值降低（P＜0.05）。(2) TW

4、L:與C組比較，S組和B組在造模術(shù)后第3d的TWL值降低(P＜0.05）;與術(shù)前基礎(chǔ)值比較，S組和B組在造模術(shù)后第3d的TWL值降低(P＜0.05);其余各時點的TWL值與C組和基礎(chǔ)值比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義。(3) ASICs通道蛋白的表達水平:B組大鼠在術(shù)后7d、14d、21d脊髓ASIC1a、 ASIC2a和DRG中ASIC3的蛋白表達水平均較C組相應(yīng)時間點高(P＜0.05)。
　　結(jié)論：骨癌痛大鼠脊髓ASIC1a、ASIC2a

5、和DRG中ASIC3蛋白表達上調(diào)，脊髓和DRG ASICs可能參與骨癌痛形成。
　　第二部分鞘內(nèi)注射ASICs抑制劑對骨癌痛大鼠痛閾及ASICs表達的影響。
　　目的：觀察鞘內(nèi)注射ASICs抑制劑阿米洛利對骨癌痛大鼠痛閾及ASICs表達的影響。
　　方法：雌性SD大鼠(200±50g)，鞘內(nèi)置管成功后隨機分為5組(n=14):假手術(shù)組（S組）、假手術(shù)+阿米洛利組(SA組)、骨癌痛組（B組）、骨癌痛+生理鹽水組(BN組)

6、、骨癌痛+阿米洛利組（BA組）。采用Walker-256乳腺癌細胞構(gòu)建大鼠脛骨癌痛模型，方法同第一部分。造模成功后，于術(shù)后第7～9天，SA組和BA組每天1次鞘內(nèi)注射阿米洛利(0.1mg/10μl)，BN組注射10μl生理鹽水，S組和B組不作鞘內(nèi)注射。于術(shù)前1d、術(shù)后1d、3d、5d、7d、9d、11d、14d、21d測定各組大鼠MWT和TWL;于術(shù)后14d取脊髓和DRG標本，Western blot法分別檢測脊髓中ASIC1a、ASIC

7、2a和DRG中ASIC3通道蛋白的表達變化情況。
　　結(jié)果：(1)MWT:與S組比較，B組、BN組、BA組在術(shù)后第5d、7d、9d、11d、14d、21d的MWT值降低(P＜0.05）;與術(shù)前基礎(chǔ)值比較，B組、BN組、BA組在術(shù)后第5d、7d、9d、11d、14d、21d的MWT值降低(P＜0.05）。鞘內(nèi)注射阿米洛利后，BA組在術(shù)后第7d、9d、11d、14d、21d的MWT值較B組升高(P＜0.05)。(2) TWL:術(shù)后第3

8、d各組大鼠的TWL值較基礎(chǔ)值降低(P＜0.05);各組大鼠TWL值組間比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。(3) ASICs通道蛋白的表達水平:B組、BN組、BA組脊髓ASIC1a、ASIC2a和DRrG中ASIC3的蛋白表達水平均較S組高(P＜0.05);鞘內(nèi)注射阿米洛利后BA組脊髓ASIC1a、ASIC2a和DRG中ASIC3蛋白表達水平較B組降低(P＜0.05)。
　　結(jié)論：鞘內(nèi)注射ASICs抑制劑阿米洛利能一定程度抑制脊