游離脂肪酸對大鼠腎小球系膜細(xì)胞增殖和細(xì)胞外基質(zhì)分泌的影響.pdf

1、　　目的：游離脂肪酸(FFAs)不僅作為能量代謝和細(xì)胞生物膜合成的原料以及細(xì)胞的信息傳遞物質(zhì)的前體物質(zhì)，還能作為“激素”直接發(fā)揮更廣泛的作用：FFAs除可引起胰島素抵抗、糖耐量異常，進一步加重糖尿病各系統(tǒng)的損傷之外，還可引起血管內(nèi)皮系統(tǒng)損傷而導(dǎo)致冠心病、動脈硬化等心血管疾病的發(fā)生。目前FFAs在腎臟疾病發(fā)病機制中的研究正處于起步階段，而且研究多集中于FFAs與腎間質(zhì)纖維化的關(guān)系。FFAs在腎小球疾病的發(fā)病機制中的作用目前尚未明了。腎小球

2、硬化是慢性腎衰竭(CRF)的基本病理改變，而腎小球系膜細(xì)胞(MC)增殖和細(xì)胞外基質(zhì)(ECM)分泌在腎小球硬化(GS)中起重要作用，MC是腎小球固有細(xì)胞中合成ECM最強的細(xì)胞，是導(dǎo)致GS的特殊間質(zhì)效應(yīng)細(xì)胞。本課題利用體外培養(yǎng)的大鼠腎小球系膜細(xì)胞株(HBZY-1)，研究FFAs與大鼠MC增殖、合成分泌Ⅳ型膠原、纖維連接蛋白(FN)及轉(zhuǎn)化生長因子(TGF-β1)的關(guān)系，以探討FFAs在GS中的作用，為臨床應(yīng)用降脂藥物治療慢性腎小球疾病進一步提

3、供理論依據(jù)。 方法：應(yīng)用細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)培養(yǎng)HBZY-1細(xì)胞，免疫細(xì)胞化學(xué)鑒定為大鼠MC；應(yīng)用四甲基偶氮唑藍(lán)(MTT)比色法和流式細(xì)胞術(shù)(FCM)觀察FFAs對HBZY-1細(xì)胞增殖及細(xì)胞周期的影響；應(yīng)用半定量RT-PCR法檢測FFAs對HBZY-1細(xì)胞表達(dá)Ⅳ型膠原、FN、TGF-β1mRNA的影響；應(yīng)用ELISA法檢測FFAs對HBZY-1細(xì)胞合成分泌Ⅳ型膠原、FN的影響。 結(jié)論：1.倒置相差顯微鏡觀察和免疫細(xì)胞化學(xué)鑒定證實所用