吲哚青綠染色對視網(wǎng)膜細胞與功能的影響.pdf

1、叫噪青綠染色對視網(wǎng)膜細胞與功能的影響內(nèi)容提要目的:通過體外試驗和臨床隨訪分析研究不同濃度叫噪青綠(indocyaninegreen[CG)ICG對人視網(wǎng)膜色素上皮細胞(RetinalpigmentepitheliumRPE)，神經(jīng)膠質細胞(RetinalglialcellRGC)，眼視網(wǎng)膜形態(tài)、功能的影響。方法:(1)觀察測定ICG在RPE細胞內(nèi)的吸收和代謝周期。(2)測定工CG在不同溶劑中溶解的PH值與滲透壓，觀察不同濃度ICG對兩種

2、視網(wǎng)膜細胞形態(tài)和功能的的影響。(3)觀察不同濃度工CG對尸體眼視網(wǎng)膜形態(tài)的影響。(4)RTPCR法測定ICG對RPE內(nèi)SOD與Bcl2基因表達的影響。(5)對比使用或不使用ICG組高度近視眼黃斑孔患者術后視功能變化，評價工CG對玻璃體手術及其預后的影響。結果:(1)0.25mgmlICG與RPE細胞共同培養(yǎng)1小時后胞漿內(nèi)出現(xiàn)圓形工CG顆粒，隨時間延長細胞內(nèi)顆粒增多，24小時達到飽和。以后，隨時間延長細胞內(nèi)ICG逐漸減少。7天后透射電鏡下

3、顯示胞漿內(nèi)個別工CG顆粒殘留。RPE細胞對0.25mgml工CG的代謝周期約為7天。(2)ICG在不同溶劑中的溶解度不同。ICG處理后，視網(wǎng)膜神經(jīng)膠質細胞和視網(wǎng)膜色素上皮細胞A值降低，損害程度與溶液濃度和作用時間成正比(P0.05)0(3)隨濃度增加，作用時間延長工CG引起尸體眼視網(wǎng)膜由內(nèi)向外各層結構破壞逐漸加重，直至細胞完全破裂死亡。(4)叫噪青綠聯(lián)合光照光照后細胞內(nèi)H202和細胞間的氧自由基表達明顯增強，強光較中等強度光照組明顯。同

4、時，SOD基因表達隨時間延長增加，各時段基因表達差異有極顯著性意義(P0.01)，在30分鐘達高峰，以后下降。(5)工CG輔助內(nèi)界膜剝離和術后眼底激光治療可提高高度近視眼黃斑孔視網(wǎng)膜脫離的一次手術成功率。但術后OCT掃描發(fā)現(xiàn)ICG組裸露型多見，視網(wǎng)膜厚度變薄(pO.05)，可能與工CG對RPE和神經(jīng)上皮的毒性有關。結論:(1)RPE細胞對工CG代謝緩慢。(2)低濃度ICG溶液對RPE和RGC細胞形態(tài)無影響，但能影響細胞內(nèi)線粒體酶的活性。

5、(3)不同濃度工CG可引起視網(wǎng)TheeffctofindocyaninegreenstainonretinalcellsandfunctionAbstractObjective:TostudytheeffectsofICGonthestructuresandfunctionsofhumanretina，retinalpigmentepithelialcellsandretinalglialcellthroughMethods:serie

6、sofinvitroexperimentsandclinicfollowup.(1)ToinvestigateTomeasurethePHvaluemetabolismcycleofICGinREPcells.osmoticpressureofICGindifferentventandevaluatetheaffectionofICGoncellsstructureand、、月了1..J9白02萬、5function.(3)Tostud

7、ytheeffectsofdifferentconcentrationoncorpseretina.(4)Reversetranscriptasepolymerasechainreaction(RTPCR)wasemployedtodeterminedtheexpressionofSODandBcl2gene.(5)Comparetheresultsofpatientsvisualfunctionaftersurgerytoevalua

8、teeffectsofICGonthevitrectomyanditsprognosis.Results:(1)CocultureRPEwith0.25mgmlICGfor1hourroundICGparticlesappearsinthecytoplasmtheparticlesincreasetillitreachedsaturationat24hoursthendecrease.Remnantparticlesstillshows

9、inthecytoplasmundertransmissionelectronmicroscopeafter7days.Themetabolismcycleof0.25mgmlICGbyRPEisabout7days.(2)ThetoxicityofICGindifferentsolventisvarious.AfterICGtreatmenttheAvalueofRGCandRPEcellsdecreasethedegreeofthe

10、destructionisdependedontheconcentrationofthesolutionandthedurationofthecontact(P0.05).(3)IncreasetheconcentrationofsolutionanddurationofitscontactwiththecadavericretinaThedestructionoftheretinafrominnertoouterlayerinduce