紅景天提取物對高脂飲食大鼠肝臟PPAR-α、PPAR-γ的影響.pdf

1、隨著社會(huì)經(jīng)濟(jì)發(fā)展，物質(zhì)生活水平提高，人們的飲食結(jié)構(gòu)發(fā)生了重大變化。高脂肪等高熱量的攝入增加，體力活動(dòng)減少使得高脂血癥的發(fā)病率已日趨增高。高脂血癥是指血漿中膽固醇(TC)和/或三酰甘油(TG)水平升高，實(shí)際上是血漿中某一類或某幾類脂蛋白代謝紊亂，包括高TG血癥、高TC血癥以及低高密度脂蛋白血癥。高脂血癥是冠狀動(dòng)脈粥樣硬化的主要危險(xiǎn)因素之一，而冠心病(Coronary heartdisease)是嚴(yán)重危害人體健康、影響生活質(zhì)量的常見病、多發(fā)

2、病。近年來中醫(yī)藥在調(diào)節(jié)血脂，防治冠心病方面取得了較大的發(fā)展，紅景天提取物就是其中的一種。紅景天提取物是由高原中藥圣地紅景天提取而成的，具有益氣活血、通脈止痛的作用。大量臨床和動(dòng)物實(shí)驗(yàn)證明紅景天在降低血脂方面作用顯著，并且通過降低血脂的作用發(fā)揮其改善冠心病的癥狀。臨床上多用于血瘀所致的冠心病、心絞痛、心肌缺血，不但療效肯定且未發(fā)現(xiàn)任何副作用，但其改善血脂的作用機(jī)制尚需進(jìn)一步研究。 1990年,Issemann等發(fā)現(xiàn)了一種新的甾體激

3、素類受體，稱作過氧化物酶體增殖物激活受體(PPAR)，它能被脂肪酸和一些外源性的過氧化物酶體增殖劑激活，參與調(diào)控脂類代謝和免疫反應(yīng)等生理過程。PPARs根據(jù)其結(jié)構(gòu)及功能可分為PPAR-α、PPAR-β、PPAR-γ三種亞型。其中PPAR-α高水平表達(dá)在肝細(xì)胞、心肌細(xì)胞、腸細(xì)胞及腎近曲小管細(xì)胞；PPAR-γ則主要表達(dá)在脂肪細(xì)胞。PPAR是核受體超家族成員之一，可以促進(jìn)脂肪細(xì)胞分化，在脂類代謝中起著重要的作用，可能是體內(nèi)脂質(zhì)平衡的生理傳感器

4、，在維持體內(nèi)脂質(zhì)代謝的動(dòng)態(tài)平衡中起到樞紐作用。本研究通過以高脂飲食喂養(yǎng)正常成年Wistar大鼠，誘導(dǎo)出高脂血癥模型大鼠。觀察紅景天提取物對高脂血癥大鼠肝臟PPAR-α、PPAR-γ表達(dá)的影響，從而進(jìn)一步深入探討紅景天對脂代謝影響的作用機(jī)理。 方法：清潔級健康成年雄性Wistar大鼠30只(購于河北醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心)，體重250～300g，適應(yīng)性喂養(yǎng)一周后隨機(jī)分為2組，對照組(Normal Control，NC組)10只，高脂

5、組(High-fat Diet，HF組)20只。對照組給基礎(chǔ)飼料，熱量組成為碳水化合物熱卡占65.5％，脂肪熱卡占10.3％，蛋白質(zhì)熱卡占24.2％；高脂組給高脂飼料，熱量組成為碳水化合物熱卡占20.1％：脂肪熱卡占59.8％；蛋白質(zhì)熱卡占20.1％。所有飼料均由河北醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心配制。喂養(yǎng)4周后再將高脂組隨機(jī)分為高脂對照組(Hyperlipidemic,HL組)和高脂+紅景天干預(yù)組(Hyperlioidemic+Integrip

6、etal rhodiola herb，HLR組)，每組10只。高脂+紅景天干預(yù)組給予紅景天提取物1g·kg<'-1>·d<'-1><'[16]>灌胃。高脂對照組給予等量的生理鹽水灌胃，飼養(yǎng)條件不變。于實(shí)驗(yàn)4周和8周時(shí)測量大鼠體重、血壓，并經(jīng)心臟采血測血清甘油三酯(TG)，血清總膽固醇(TC)，用銅顯色法測定血中游離脂肪酸(FFA)的含量。于實(shí)驗(yàn)第8周將大鼠處死后迅速取肝臟組織凍存，用于熒光定量PT-PCR法測定肝臟PPAR-α mRNA

7、、PPAR-γ mRNA的表達(dá)，并進(jìn)行BP、FFA、TC、TG和肝臟PPAR-α mRNA、PPAR-γ mRNA的表達(dá)的相關(guān)性分析。 結(jié)果：1.第4周后HF組體重(293.66±27.57)g與NC組(265.33±31.15)g相比差異略有升高，但無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。第8周末HL組體重(323.66±29.09)g和NC組(311.33±26.31)g相比升高，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；HLR組大鼠體重(3

8、17.71±22.38)g和HL體重相比下降，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；HLR組體重和NC組相比，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。 2.第4周后HF組大鼠血壓(106.25±14.82)mmHg與NC組(86±15.05)mmHg相比升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。第8周末HL組血壓(124.3±7.3)mmHg與NC組(93.6±11.4)mmHg血壓相比升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)；HLR組血壓(

9、94.3±7.7)mmHg與HL組血壓相比下降，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)；HLR組血壓與NC組血壓相比，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。 3.血生化指標(biāo)：第4周后HF組TIE(0.95±0.07)mmol/L與NC組(0.76±0.12)mmol/L相比升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)；HF組TG(0.75±0.09)mmol/L與NC組(0.60±0.10)mmol/L相比升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)

10、。第8周末HL組TC(1.01±0.01)mmol/L與NC組(0.81±0.09)mmol/L相比顯著升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)；HL組TG(0.74±0.04)mmol/L與NC組(0.59±0.09)mmol/L相比顯著升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)；HLR組TC(0.78±0.14)mmol/L和HL組(1.01±0.01)mmol/L相比顯著下降，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)；HLR組TG(0.58±0

11、.11)mmol/L和HL組(0.74±0.04)mmol/L相比顯著下降，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；HLR組TC和NC組相比下降，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；HLR組TG和NC組相比，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。 4.不同飲食喂養(yǎng)4周后HF組FFA(1145.42±261.84)umol/L與NC組(653.33±153.04)umol/L相比升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。喂養(yǎng)8周后HL組FFA(1252

12、.4±432.6)umol/L與NC組(676.3±138.5)umol/L相比升高，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。HLR組FFA(780.3±164.9)umol/L與HL組(1252.4±432.6)umol/L下降，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；HLR組FFA與NC組相比，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)； 5.各組喂養(yǎng)8周后肝臟PPAR-α mRNA、PPAR-γ mRNA的表達(dá)： 第8周后肝臟PPAR-α

13、mRNA的表達(dá)：HL組肝臟PPAR-α mRNA的表達(dá)(3.8590±0.8324)與NC組(7.7322±1.9394)相比顯著下降，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。HLR組肝臟PPAR-α mRNA的表達(dá)(19.0780±12.6199)與HL組相比顯著升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)；HLR組肝臟PPAR.α mRNA的表達(dá)與NC組相比顯著升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)： 第8周后肝臟PPAR-γ mRNA

14、的表達(dá)：HL組肝臟PPAR-γ mRNA的表達(dá)(0.3916±0.1248)與NC組(0.3674±0.1209)相比，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。HLR組肝臟PPAR-γ mRNA的表達(dá)(4.450±1.6464)與HL組相比顯著升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)；HLR組肝臟PPAR-γ mRNA的表達(dá)與NC組相比顯著升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。 6.相關(guān)分析結(jié)果，選擇肝臟PPAR-α mRNA、PPA

15、R-γmRNA的表達(dá)分別與BP和血清FFA、TC、TG進(jìn)行相關(guān)性分析，結(jié)果顯示肝臟PPAR-α mRNA的表達(dá)與BP和血清TC、TG、FFA有明顯負(fù)相關(guān)(γ值分別為-0.9464、-0.8717、-0.9178、-0.8282)p值分別為(0.0042、0.0236、0.0098、0.0417)；肝臟PPAR-γ mRNA的表達(dá)與BP和血清TG、TC、FFA無明顯相關(guān)性。 結(jié)論： 1.經(jīng)高脂飲食喂養(yǎng)成年Wistar大鼠出

16、現(xiàn)了高膽固醇、高甘油三脂血癥，血壓升高，成功地誘發(fā)出高脂血癥大鼠模型。 2.第8周后高脂飲食喂養(yǎng)的大鼠TC、TG、FFA和BP均顯著升高。經(jīng)紅景天提取物藥物干預(yù)的大鼠TC、TG、FFA和BP均顯著下降。 3.第8周后高脂飲食喂養(yǎng)的大鼠肝臟PPAR-α mRNA表達(dá)顯著下降、PPAR-γ mRNA表達(dá)無顯著改變。經(jīng)紅景天提取物藥物干預(yù)的大鼠肝臟PPAR-α mRNA表達(dá)顯著升高，PPAR-γ mRNA表達(dá)也顯著升高。