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文檔簡介
1、目的:本課題應(yīng)用D-半乳糖衰老小鼠模型,觀察益髓灸處方對D-半乳糖衰老小鼠血清、腦組織的8-羥基脫氧鳥苷酸(8-OHdG)、總抗氧化能力(T-AOC)、klotho蛋白的影響,比較足三里配懸鐘、百會(huì)配關(guān)元兩組穴位處方抗氧化延緩腦衰老效應(yīng),探討其作用機(jī)制,為臨床綜合防治腦衰老提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
方法:SPF級3月齡雄性昆明小鼠體重30±2g(由廣西醫(yī)科大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心提供)60只,分組前先做動(dòng)物水迷宮檢測,后隨機(jī)分為4組,生理鹽水組
2、(簡稱生理組)、造模組、艾炷灸足三里+懸鐘穴組(簡稱艾灸1組)、艾炷灸百會(huì)+關(guān)元穴組(簡稱艾灸2組),每組15只。造模組和各艾炷灸治療組以D-半乳糖按1000mg/kg/d頸背部皮下注射,連續(xù)56天,同時(shí)生理組頸背部皮下注射等量的生理鹽水56天。造模第13天兩組艾灸治療組開始艾灸,每次每穴三壯,灸單側(cè)(或兩穴),共6壯。生理鹽水組及造模組不做任何治療性干預(yù),但給予與各治療組同樣時(shí)間、同樣程度的刺激。造模、治療結(jié)束后,眼球取血,斷頭取腦,
3、制備腦組織勻漿,用酶聯(lián)免疫法(ELISA)檢測血清及腦組織8-羥基脫氧鳥苷酸(8-OHdG)、總抗氧化能力(T-AOC)、klotho蛋白水平。
結(jié)果
(1)四組血清、腦組織中8-OHdG水平有顯著性差異(P<0.01),兩兩比較提示,模型組明顯高于生理組、艾灸1組和艾灸2組,差異有顯著性意義(P<0.01),其余3組,組間無顯著性差異;
(2)四組血清、腦組織中T-AOC含量有顯著性差異(P<0.01),
4、兩兩比較提示,造模組明顯低于生理組、艾灸1組和艾灸2組,差異有顯著性意義(P<0.01),其余3組,組間無顯著性差異;
(3)四組血清Klotho蛋白含量有顯著性差異(P<0.01),兩兩比較提示,造模組含量明顯低于生理組、艾灸1組和艾灸2組,差異有顯著性意義(P<0.01),其余3組,組間無顯著性差異;四組腦組織中β-Klotho蛋白含量有顯著性差異(P<0.01),兩兩比較提示,造模組含量明顯低于生理組、艾灸1組和艾灸2組
5、,差異有顯著性意義(P<0.01),其余3組,組間無顯著性差異。
結(jié)論:
(1)本課題在頸背部以1000mg/kg/d的劑量注射D-半乳糖56天成功復(fù)制了氧化應(yīng)激腦衰老動(dòng)物模型。
(2)益髓灸處方“足三里+懸鐘”和“百會(huì)+關(guān)元”均能有效抑制D-半乳糖腦衰老模型小鼠的細(xì)胞DNA損傷,提高腦衰老模型小鼠的抗氧化能力。
(3)益髓灸防治腦衰老的作用機(jī)制可能是通過降低D-半乳糖誘導(dǎo)的8-羥基脫氧鳥苷酸(8
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