三倍體牙鲆生物學(xué)性狀和遺傳多樣性分析.pdf

1、AnalysisofthebiologicaltraitsandgeneticdiversityoftriploidoliveflounderParalichthysolivaceusThesissubmittedto(墓ngdaoAgriculturalUniversityInFulfillmentoftheRequirementfortheDegreeofMasterofAgronomy1一一LiuHui(CollegeofAnim

2、alScienceandVeterinaryMedicine)Supervisor：LiZhenYouFengZhuXiangpingQingdaoChinaJune，2014青島農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文摘要三倍體牙鲆生物學(xué)性狀和遺傳多樣性分析摘要本研究對冷休克誘導(dǎo)的三倍體及對照組牙鲆的生長狀況、營養(yǎng)成分以及骨骼形態(tài)進行了比較和分析；同時，采用微衛(wèi)星分子標(biāo)記技術(shù)對這兩個群體的遺傳多樣性進行了研究。1、通過定期測量二倍體和三倍體的全長、體重等

3、生長性狀，比較了不同倍性牙鲆的生長情況。在孵化后的11個月內(nèi)，三倍體的全長和體重均高于二倍體，其中2、5、9月齡的三倍體全長和體重均顯著高于二倍體(尸005)。2、用x光照相技術(shù)對牙鲆骨骼形態(tài)進行觀察。發(fā)JEYY養(yǎng)殖條件下，二倍體對照組和三倍體組均有脊椎畸形現(xiàn)象，常見的脊椎畸形有4種：椎體聚合、椎體單面壓縮、椎體雙面壓縮和椎體移位，其中椎體聚合是最常見的脊椎畸形，567％的三倍體和333％的二倍體都出現(xiàn)椎體聚合：在二倍體和三倍體中，第8

4、16塊和尾部最后10塊區(qū)域內(nèi)的椎骨畸形率均較高?？傮w來說，三倍體牙鲆的骨骼畸形率顯著高于二倍體(三倍體，600％；二倍體，333％，P005)，三倍體發(fā)生脊椎畸形的個體數(shù)和各種畸形出現(xiàn)的次數(shù)也均高于二倍體。3、對三倍體牙鲆肌肉的營養(yǎng)成分進行測定，并與二倍體進行比較。結(jié)果表明，二倍體和三倍體肌肉營養(yǎng)成分總體差異不大，其中水分、蛋白質(zhì)、脂肪、灰分含量均沒有顯著差異。二倍體和三倍體含有相同種類的氨基酸和脂肪酸。三倍體肌肉中的蛋白質(zhì)、飽和脂肪酸

5、、多不飽和脂肪酸和必需氨基酸含量高于二倍體，但是差異并不顯著。三倍體的16：00、20：4∞6、EPA三種脂肪酸含量顯著低于二倍體儼005)，Thr、Gly、Arg、18：1c07、20：2國6、DHA含量顯著高于二倍體(尸005)。4、采用微衛(wèi)星遺傳標(biāo)記技術(shù)對冷休克誘導(dǎo)的三倍體群體及二倍體對照群體進行比較分析，取培育至11月齡三倍體及同期二倍體對照矛鲆個體各32尾，通過高鹽法提取肌肉組織總DNA，利用篩選得到的21對微衛(wèi)星引物進行PC

6、R擴增，并經(jīng)14％聚丙烯酰胺凝膠電泳進行分型后，進行人工判讀和分析。結(jié)果顯示，21個微衛(wèi)星位點均為多態(tài)，二倍體和三倍體群體的平均等位基因數(shù)a)、基因型6數(shù)、平均有效等位基因數(shù)池)、平均觀測雜合度(㈨和平均期望雜合度(玩)分別為56和50，190和142，37和28，0613和0868。0681和O629。二倍體和三倍體群體的多態(tài)信息含量(PIC)分別為O642和O589，個體識別率㈤為O660和0609，非父排除率㈣為0482和0399