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1、目的:用BMP2干預(yù)肝癌細(xì)胞系HepG2細(xì)胞,從而觀察肝癌細(xì)胞中BMP2對(duì)PTEN蛋白表達(dá)的影響,探討B(tài)MP2與PTEN蛋白水平之間的關(guān)系,研究BMP2是否能減少PTEN蛋白的降解,探索肝癌治療的新途徑。 方法:將受試對(duì)象分為三個(gè)組:對(duì)照組、100ng/mlBMP2組、300ng/mlBMP2組,作用時(shí)間分為三個(gè)水平:6小時(shí)、12小時(shí)和24小時(shí)。用BMP2干預(yù)前1小時(shí)先將10ug/ml放線菌酮加入培養(yǎng)的細(xì)胞當(dāng)中以阻斷PTEN分子
2、水平的合成。用免疫組化方法測(cè)定不同BMP2濃度組,不同時(shí)間點(diǎn)的細(xì)胞中PTEN蛋白水平。不同濃度BMP2干預(yù)后在不同時(shí)間點(diǎn)即6小時(shí),12小時(shí),24小時(shí)用MTT法測(cè)定細(xì)胞的活力,觀測(cè)HepG2細(xì)胞生長(zhǎng)是否受到抑制。 結(jié)果:(1)采用圖像分析系統(tǒng)分析結(jié)果顯示:a、在不同濃度BMP2組中HepG2細(xì)胞中PTEN蛋白表達(dá)存在明顯差異。PTEN蛋白陽(yáng)性表達(dá)率在300ng/ml組與100ng/ml組、100ng/ml組與對(duì)照組、300ng/m
3、l組與對(duì)照組之間有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。b、不同時(shí)間組中PTEN蛋白表達(dá)也存在明顯差異。PTEN蛋白陽(yáng)性表達(dá)率在6小時(shí)組與12小時(shí)組、12小時(shí)組與24小時(shí)組、6小時(shí)組與24小時(shí)組之間有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。c、濃度與時(shí)間之間無交互作用,差別無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。(2)MTT結(jié)果顯示:HepG2細(xì)胞在各個(gè)時(shí)間點(diǎn)生長(zhǎng)均受到抑制,其中以24小時(shí)為高峰。亦呈濃度效應(yīng)關(guān)系,即不同濃度BMP2組HepG2細(xì)胞抑制狀況也不同,其中
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