活體視神經(jīng)示蹤劑錳離子對視網(wǎng)膜毒性的研究.pdf

1、視神經(jīng)損傷是眼科臨床中常見的一種外傷毀損性疾病，約占頭部閉合性損傷的0.5％～5％，嚴(yán)重時可導(dǎo)致長期乃至永久性的視力障礙或失明。因此，視神經(jīng)的損傷及其損傷后修復(fù)即成為長久以來人們關(guān)心的研究熱點。
　　 以往，在視神經(jīng)損傷和損傷后修復(fù)的研究中，應(yīng)用的損傷神經(jīng)定位技術(shù)均必須將動物處死，進(jìn)行病理切片才能進(jìn)一步觀察損傷情況。如果可以找到一種無創(chuàng)性的觀察活體視神經(jīng)軸漿流及突觸傳遞動態(tài)過程的技術(shù)，勢必會對視神經(jīng)損傷后修復(fù)的研究起到重要指導(dǎo)作

2、用。
　　 近年來，基于二價錳離子(Mn2+)的特性，以Mn2+作為神經(jīng)示蹤劑的磁共振成像技術(shù)，使得活體示蹤視神經(jīng)成為可能。應(yīng)用該技術(shù)，Pautler、Koretsky和Thuen等多為學(xué)者在研究小鼠和大鼠的視覺通路時發(fā)現(xiàn)，將Mn2+注入眼玻璃體腔，Mn2+可被視網(wǎng)膜神經(jīng)細(xì)胞攝取，軸漿上行運輸?shù)纫幌盗羞^程，最終借助磁共振成像技術(shù)成功顯影視神經(jīng)。但是，研究多集中在較小動物身上，對較大動物視神經(jīng)功能成像的研究尚很少，且隨著玻璃體腔內(nèi)

3、注入Mn2+的廣泛應(yīng)用，Mn2+對視網(wǎng)膜的毒性作用亦漸漸引起了人們的關(guān)注。究竟影像增強(qiáng)劑Mn2+有多大毒性，能夠造成何種程度的損傷人們還知之甚少。
　　 依據(jù)我們以往的實驗研究結(jié)果，本實驗在青紫蘭兔眼玻璃體腔內(nèi)注入不同濃度MnCl2溶液，觀察不同濃度不同時間點Mn2+對視網(wǎng)膜形態(tài)學(xué)和功能學(xué)方面的毒性。并篩選出既能有效顯影視神經(jīng)又不會造成視功能損傷的錳離子玻璃體腔注入的安全劑量，為Mn2+增強(qiáng)MRI示蹤視神經(jīng)的臨床應(yīng)用和視神經(jīng)損傷

4、的基礎(chǔ)研究提供安全依據(jù)。
　　 目的：1、研究不同濃度下活體視神經(jīng)示蹤劑Mn2+對視網(wǎng)膜形態(tài)學(xué)和功能學(xué)上的影響。2、觀察不同濃度下Mn2+對眼視網(wǎng)膜組織的毒性損傷特征，從而篩選出安全且有效的視神經(jīng)顯影濃度，為臨床應(yīng)用及實驗研究提供依據(jù)。
　　 方法：60只青紫蘭兔120眼隨機(jī)分為5組，分別單眼玻璃體腔中注入MnCl210、15、20、30、40mmol/L 25μl。于術(shù)前及術(shù)后7d、28d行眼底彩色照相、熒光眼底血管造

5、影、閃光視網(wǎng)膜電圖(flash electroretinography，F(xiàn)-ERG)檢測，并摘除眼球行視網(wǎng)膜光學(xué)顯微鏡和電子顯微鏡檢查，觀察并評價不同濃度Mn2+對視網(wǎng)膜形態(tài)學(xué)及功能學(xué)上的毒性損傷情況。
　　 結(jié)果：1、15 mmol/L濃度組：F-ERG b波振幅均值分別為注藥前(337μV)、注藥后7d(189μV)、注藥后28d(317μV)，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(F=20.43，P=0.02)。其中，注藥后7d，F(xiàn)-ERG

6、b波振幅與術(shù)前正常b波振幅相比有所降低(P<0.01)，28d b波振幅恢復(fù)正常(P>0.05)；2、≥20 mmol/L濃度組：注藥后7d，F(xiàn)-ERG b波振幅與術(shù)前正常b波振幅相比有所降低(P<0.01)，至28d b波振幅未見恢復(fù)(P<0.01)；3、光鏡及透射電鏡觀察，≥20 mmol/L濃度組注藥后各時間點均有視網(wǎng)膜組織結(jié)構(gòu)的異常改變。
　　 結(jié)論：1、MnCl2作為視神經(jīng)活體示蹤劑，在有效的顯影濃度內(nèi)，青紫蘭兔眼玻璃