抗HER2納米抗體五聚物的構(gòu)建與功能研究.pdf

1、HER2為表皮生長因子受體超家族成員，是人類腫瘤中發(fā)生改變頻率最高的原癌基因之一。其基因表達(dá)水平和基因拷貝數(shù)目在幾種人類腫瘤細(xì)胞中都有顯著升高，特別是在乳腺癌、卵巢癌和胃癌中升高更為顯著。HER2在乳腺癌和許多其他癌癥中的過表達(dá)伴隨著很多預(yù)后不良反應(yīng)如腫瘤進(jìn)展快，易復(fù)發(fā)，這使得HER2成為理想的抗腫瘤免疫治療的靶標(biāo)。抗HER2抗體能夠通過干擾HER2這種腫瘤生長過程中的重要媒介誘導(dǎo)抗腫瘤效應(yīng)，也可以作為靶向分子用來轉(zhuǎn)運(yùn)治療藥物至HER2

2、過表達(dá)的腫瘤細(xì)胞表面，這構(gòu)成了抗體依賴性療法的基礎(chǔ)。
　　 1.抗HER2單域抗體目前,已開發(fā)了多種靶向 HER2抗體藥物,包括抗HER2 單鏈抗體scFv。scFv 抗原識(shí)別特異性強(qiáng)，易于基因工程大量生產(chǎn)，但是其相對復(fù)雜的分子結(jié)構(gòu)，仍然具有免疫原性，結(jié)構(gòu)的不穩(wěn)定性，和構(gòu)建方法的繁瑣大大限制了其在醫(yī)療領(lǐng)域的應(yīng)用。單域抗體也稱納米抗體，其輕鏈缺失，僅由兩條重鏈構(gòu)成。相比而言，分子結(jié)構(gòu)更簡單，尺寸更小，更穩(wěn)定，親和力更高，免疫原性更

3、低，更易表達(dá)純化。
　　 納米抗體的上述優(yōu)勢使其在腫瘤靶向性治療方面具有更大的應(yīng)用前景。應(yīng)用噬菌體篩選技術(shù)，我們從單域抗體文庫中篩選出高親和力的抗HER2單域抗體，并測定其基因序列。
　　 2.納米抗體五聚物Vero毒素，或志賀氏桿菌樣毒素，是一種AB5型毒素，其中B亞基能自組裝成五聚體，是一種良好的自組裝單位。將單域抗體與大腸桿菌Vero毒素B亞基（VTB）融合，VTB-sdAb自組裝，從而構(gòu)建出同形五聚物即納米抗體五