月經(jīng)期應(yīng)用中藥雙花坤孕膠囊治療慢性輸卵管炎性不孕癥臨床及實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、第一部分臨床研究 目的：觀察月經(jīng)期應(yīng)用具有清熱解毒、活血通絡(luò)作用的雙花坤孕膠囊治療慢性輸卵管炎性不孕癥臨床療效，并探討作用機(jī)理。 方法：采用臨床隨機(jī)對(duì)照的方法，納入標(biāo)準(zhǔn)為具有①所有患者均經(jīng)子宮、輸卵管碘油造影或兩次輸卵管通液，證實(shí)輸卵管阻塞、不通暢或積水；②夫婦同居未避孕2年以上，配偶檢查無異?；蛴猩诚到y(tǒng)疾病經(jīng)治后痊愈；③患者并符合中醫(yī)濕瘀互結(jié)型為主，臨床癥狀主要有腹痛、帶下量多、經(jīng)血有塊、舌暗紅或有瘀斑、苔白膩或黃膩

2、等。將所選病例隨機(jī)分為治療1組和對(duì)照1、2組，每組各20例。三組患者在年齡、性別、病程等方面均無顯著性差異。治療組在月經(jīng)期服用雙花坤孕膠囊(銀花、紅花、三棱、莪術(shù)、丹參、香附、穿山甲、路路通、敗醬草、薏苡仁等)。對(duì)照1組于非月經(jīng)期服用雙花坤孕膠囊。對(duì)照2組為西藥治療組(環(huán)丙沙星片)。對(duì)照1、2組均在月經(jīng)期停用藥物。各組治療均以三個(gè)月為1個(gè)療程，連續(xù)治療1～2個(gè)療程。觀察指標(biāo)：①治療前后輸卵管造影或通液檢查通液情況；②隨訪兩年妊娠情況。③

3、臨床主要癥狀改善的情況；④經(jīng)期用藥對(duì)月經(jīng)的影響；⑤經(jīng)期用藥期間血雌、孕激素水平變化。療效評(píng)定標(biāo)準(zhǔn)：①《中藥新藥治療女性不孕癥的臨床研究指導(dǎo)原則》[1]中所列療效評(píng)定標(biāo)準(zhǔn)：痊愈：治療后兩年內(nèi)妊娠；無效：經(jīng)連續(xù)治療后兩年內(nèi)未妊娠。②輸卵管造影或通液檢查結(jié)果判斷輸卵管的疏通情況。分通暢、通而不暢、不通三級(jí)[2]。③腹痛、腰痛程度及療效采用積分法。參照《中藥新藥治療痛經(jīng)的臨床研究指導(dǎo)原則》[3]中的積分法。 結(jié)果：①輸卵管再通情況：治療

4、組與對(duì)照組比較，再通率明顯增高，有顯著差異(P＜0.01)。②兩年內(nèi)受孕率比較：治療組受孕率75％，對(duì)照1組受孕率55％，對(duì)照2組受孕率45％。治療組與對(duì)照1、2組比較(P＜0.01)，治療組顯著優(yōu)于對(duì)照1、2組。③對(duì)主要癥狀的影響：疼痛療效比較，治療組治療后總有效率88.89％，對(duì)照2組總有效率53.85％，兩組疼痛積分比較有顯著差異；治療組治療前后比較，也有顯著差異(P＜0.01)；治療組與對(duì)照2組比較也有顯著差異(P＜0.05)，

5、治療組顯著優(yōu)于對(duì)照1、2組。對(duì)帶下量多癥狀，治療組治療后有效率88.24％，對(duì)照1組75％，對(duì)照2組73.33％。三組對(duì)治療帶下量多均有一定療效。④經(jīng)期用藥期間血雌、孕激素?zé)o明顯差異。 結(jié)論：本研究表明，于月經(jīng)期采用中藥雙花坤孕膠囊治療慢性輸卵管炎性不孕癥能改善輸卵管阻塞，減輕疼痛、帶下量多癥狀，其療效優(yōu)于對(duì)照1、2組。且月經(jīng)期用藥不影響月經(jīng)期雌、孕激素水平變化、對(duì)月經(jīng)期出血量無明顯影響。觀察結(jié)果，在行經(jīng)期間，經(jīng)血聚集胞宮，血脈

6、充足，血室正開，此時(shí)服用具有清熱解毒、活血通絡(luò)作用的雙花坤孕膠囊，使?jié)岫攫鲅S血而排出，正符合中醫(yī)理論“熱從血出”的特點(diǎn)。該藥無不良反應(yīng)，并且具有簡便、經(jīng)濟(jì)特點(diǎn)，是治療慢性輸卵管炎性不孕癥的有效藥物，值得進(jìn)一步的研究開發(fā)。 第二部分實(shí)驗(yàn)研究 目的：觀察雙花坤孕膠囊對(duì)大鼠輸卵管周圍棉球肉芽腫生長的影響及炎性組織中PGE2含量的影響、雙花坤孕膠囊的體外抑菌作用、小鼠對(duì)雙花坤孕膠囊急性毒性反應(yīng)的影響。以探討雙花坤孕膠囊的抑菌抗

7、炎作用和毒性反應(yīng)。 方法：1雙花坤孕膠囊對(duì)大鼠輸卵管周圍棉球肉芽腫生長的影響 選用12～14周雌性SD大鼠40只，先將大鼠用乙醚麻醉，下腹部去毛，常規(guī)皮膚消毒。制備量為20mg的棉球，大小相等，高壓滅菌后于每個(gè)棉球加入氨芐青霉素1mg/0.1ml，在50℃烤箱烤干備用。大鼠仰臥固定，左下腹部切口，將經(jīng)上述制備的棉球植入輸卵管周圍，逐層縫合傷口。將手術(shù)后大鼠隨機(jī)分為4組，雙花坤孕膠囊1、2組分別應(yīng)用不同劑量雙花坤孕膠囊混懸

8、液灌胃，婦金康組應(yīng)用婦金康膠囊混懸液灌胃，生理鹽水用等容積(2.5ml)生理鹽水灌胃。各組每天灌胃一次，連續(xù)6天。頸椎脫臼法處死，分離肉芽腫及周圍組織，取出棉球，于60℃烤箱放置12小時(shí)后，精密稱重。觀察雙花坤孕膠囊對(duì)肉芽腫生長的影響。 方法：2雙花坤孕膠囊對(duì)大鼠炎性組織中的PGE2含量、足趾腫脹度、足趾壓痛的影響。 選用12～14周雌性SD大鼠40只，隨機(jī)分為4組，雙花坤孕膠囊1、2組分別應(yīng)用不同劑量雙花坤孕膠囊混懸液

9、(2.5g/kg、5g/kg)灌胃，對(duì)照1組應(yīng)用婦金康膠囊混懸液(3.8g/kg)，對(duì)照2組用等容積(2.5ml)5％阿拉伯膠生理鹽水灌胃。各組每天灌胃一次，連用三天，于第三天用藥后0.5小時(shí)測量大鼠左后足關(guān)節(jié)下體積，作為造模前值，于大鼠左后足趾腱下注射1％角叉菜膠0.1ml，各組于造模后1、2、4、6小時(shí)重復(fù)測量一次，比較各組足趾腫脹度的差異。并在此炎癥模型時(shí)，測定各組注射角叉菜膠致炎癥足對(duì)痛覺的敏感性。造模后6小時(shí)各指標(biāo)測量完畢后，

10、處死大鼠，在踝關(guān)節(jié)上0.5cm處剪下炎性腫脹足，剝皮稱重、剪碎，生理鹽水5ml浸潤1小時(shí)，取出足爪，離心浸泡液，吸取上清液0.1ml，加0.5mol/LKOH一甲醇溶液2ml，在50℃下異構(gòu)化20分鐘，用早醇稀釋至20ml，應(yīng)用uv754紫外可見分光度儀，于波長為278nm處測定光密度值，以每克炎性組織相當(dāng)?shù)奈展饷芏戎当硎綪GE2含量。 方法：3.雙花坤孕膠囊體外抑菌作用實(shí)驗(yàn)。 雙花坤孕膠囊原方無菌水煎液1g/ml，臨

11、用前調(diào)PH至7.0，并按倍比稀釋成10個(gè)濃度，另取一試管不加藥物作為空白對(duì)照。將受試菌株培養(yǎng)16小時(shí)后，分別加入10個(gè)試管中，于37℃孵箱內(nèi)培養(yǎng)24小時(shí)，取出觀察細(xì)菌生長情況 方法：4.雙花坤孕膠囊急性毒性實(shí)驗(yàn)影響。 選用昆明小鼠20只，雌雄各半。實(shí)驗(yàn)前小鼠禁食不禁水12小時(shí)，取雙花坤孕膠囊28g/kg有劑量，灌胃給藥1次，每10克小鼠體重0.4ml，觀察給藥后七天內(nèi)小鼠活動(dòng)、大便、小便及顏色、皮毛、膚色、呼吸、鼻腔、口

12、腔分泌物、休重變化、死亡情況。 結(jié)果：1雙花坤孕膠囊對(duì)大鼠輸卵管周圍棉球肉芽腫生長影響，結(jié)果表示：雙花坤孕膠囊1、2組大鼠肉芽腫凈重比生理鹽水組明顯減輕(p＜0.01)。亦比婦金康組為輕，有顯著性差異。 2雙花坤孕膠囊對(duì)大鼠炎性組織中PGE2含量、足跖腫脹度及壓痛的影響，結(jié)果表示：①雙花坤孕膠囊組大鼠炎性組織中PGE2含量較生理鹽水級(jí)有明顯減少(p＜0.05)，雙花坤孕膠囊1、2組間，高劑量組5g/kg較低劑量2.5g/

13、kg降低明顯(p＜0.01).②雙花坤孕膠囊組大鼠足跖腫脹度在造模后2、4、6小時(shí)與生理鹽水組相比明顯減輕(p＜0.05)，也比婦金康組足跖腫脹度明顯減輕。③雙花坤孕膠囊組在造模后2小時(shí)，開始出現(xiàn)明顯鎮(zhèn)痛作用，至6小時(shí)仍有明顯鎮(zhèn)痛作用(p＜0.05)。 3雙花坤孕膠囊對(duì)小鼠急性毒性的影響，結(jié)果表示：雙花坤孕膠囊混懸液給小鼠灌胃后，七天內(nèi)小鼠活動(dòng)、食欲、大便、小便及顏色、皮毛、膚色、呼吸均正常，鼻腔、口腔無異、分泌物、體重正常增長

14、，無小鼠死亡。 4雙花坤孕膠囊體外抑菌作用的影響，結(jié)果表示：雙花坤孕膠囊對(duì)金黃色葡萄球菌、致病性大腸桿菌、淋球菌、乙型溶血性鏈球菌、變形桿菌的菌株均有不同程度的抑菌作用。 結(jié)論：本研究結(jié)果證實(shí)雙花坤孕膠囊能明顯抑制模型中大鼠肉芽腫形成和有效降低大鼠炎性組織中PGE2含量，故能減輕疼痛、炎癥。并且能有效抑制細(xì)菌生長。表明該藥對(duì)慢性輸卵管炎及其周圍炎癥的抑制作用明確，具有抑制纖維組織增生、肉芽屏障形成作用，對(duì)慢性輸卵管炎有積