紫杉醇對人口腔上皮癌KB細(xì)胞放射增敏作用的分子機(jī)制研究.pdf

1、背景及目的：紫杉醇作為一種放射增敏劑，能穩(wěn)定微管系統(tǒng)，把細(xì)胞阻斷在G2/M期從而改變腫瘤細(xì)胞的放射反應(yīng)性。但其分子調(diào)控機(jī)制目前還未完全闡明，本文旨在研究紫杉醇的放射增敏作用及其分子機(jī)制。 研究方法：克隆形成實(shí)驗(yàn)分析不同濃度紫杉醇聯(lián)合不同照射劑量對KB細(xì)胞生長抑制率的影響，多靶單擊擬合模型方程測定各組細(xì)胞放射增敏比(SER)并評價增敏效果；流式細(xì)胞儀檢測KB細(xì)胞經(jīng)紫杉醇及射線共同作用后細(xì)胞周期分布變化；采用基因芯片技術(shù)篩選與紫杉醇

2、放射增敏作用相關(guān)的差異表達(dá)基因，在分析這些基因的基礎(chǔ)上采用熒光定量PCR技術(shù)驗(yàn)證芯片提示的細(xì)胞分裂相關(guān)基因PRC1、Cyclin B2的變化。 結(jié)果：紫杉醇與射線協(xié)同作用能明顯抑制KB細(xì)胞增殖，20nmol/l藥物協(xié)同射線作用時SER Do及SER Dq分別為2.40±1.87、12.23±2.81。藥物加照射處理后G1期細(xì)胞由48.32±2.40％下降為15.73±7.00％(P<0.01)，G2/M期細(xì)胞由13.66±2.1

3、6％上升到52.51±5.02％(P<0.01)，凋亡率與單純加藥組相比有所下降，為11.78±0.49％(P<0.05)。基因芯片結(jié)果顯示的差異變化基因中共有176條與紫杉醇放射增敏作用相關(guān)，10條在調(diào)控細(xì)胞分裂過程中起作用，其中上調(diào)表達(dá)2條，下調(diào)表達(dá)8條。熒光定量PCR證實(shí)與細(xì)胞分裂相關(guān)的PRC1和Cyclin B2均下調(diào)表達(dá)，與芯片結(jié)果一致。 結(jié)論：紫杉醇對KB細(xì)胞有明顯的放射增敏作用，其機(jī)制可能是使細(xì)胞有絲分裂相關(guān)基因P