Hedgehog-Gli信號(hào)通路對(duì)膠質(zhì)瘤細(xì)胞增殖、凋亡和侵襲能力的影響.pdf

1、目的：最近研究發(fā)現(xiàn)腦膠質(zhì)瘤中存在異?；罨腍edgehog(HH)-Gli信號(hào)通路,抑制該通路后腫瘤細(xì)胞出現(xiàn)生長(zhǎng)緩慢、成瘤能力下降等改變。然而HH-Gli信號(hào)通路對(duì)膠質(zhì)瘤細(xì)胞周期、凋亡和侵襲能力的影響,以及與臨床病理特征的聯(lián)系目前仍不清楚。
　　方法：選取2007-2009年在我科進(jìn)行手術(shù)切除的原發(fā)膠質(zhì)瘤標(biāo)本110例,使用免疫組化的方法分析細(xì)胞核內(nèi)Gli1表達(dá)與腫瘤級(jí)別、細(xì)胞增殖指數(shù)的關(guān)系。在體外實(shí)驗(yàn)中,我們使用免疫熒光染色和re

2、al-timePCR的方法檢測(cè)膠質(zhì)瘤細(xì)胞系U87、SHG-44、U251和A172中HH-Gli1信號(hào)通路的活性狀態(tài),然后使用藥物環(huán)巴胺和小RNA干擾技術(shù)在不同水平上影響該信號(hào)通路的活性,觀察一系列細(xì)胞生物學(xué)特性的變化,并使用real-timePCR的方法檢測(cè)與這些細(xì)胞生物學(xué)特性密切相關(guān)的調(diào)控基因的改變。
　　結(jié)果：在各個(gè)級(jí)別膠質(zhì)瘤中均存在異?；罨腍H-Gli1信號(hào)通路,細(xì)胞核內(nèi)Gli1蛋白的表達(dá)與腫瘤級(jí)別、細(xì)胞增殖狀態(tài)有關(guān)。體

3、外培養(yǎng)的四個(gè)膠質(zhì)瘤細(xì)胞系具有不同活性的HH-Gli1通路。對(duì)于具有該通路活化的膠質(zhì)瘤細(xì)胞U87、SHG-44和U251,環(huán)巴胺和siGlil顯著地抑制了腫瘤細(xì)胞的增殖和侵襲能力,腫瘤細(xì)胞停滯于G0/G1期,細(xì)胞凋亡率增加。進(jìn)一步研究結(jié)果顯示抑制HH-Gli1信號(hào)通路后與細(xì)胞周期、凋亡和細(xì)胞侵襲能力相關(guān)的一系列基因的表達(dá)水平發(fā)生了顯著的變化;對(duì)于HH-Gli1通路無活性的膠質(zhì)瘤細(xì)胞系A(chǔ)172,針對(duì)HH-Gli1信號(hào)通路的干預(yù)措施未引起明顯