2023年全國(guó)碩士研究生考試考研英語(yǔ)一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁(yè)
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1、目的:探討在肝細(xì)胞肝癌組織中Snail、VEGF、MMP-9三種生物學(xué)指標(biāo)的表達(dá),分析這三種生物學(xué)指標(biāo)表達(dá)強(qiáng)度之間的相關(guān)性及與臨床病理因素的相關(guān)性,及其在肝細(xì)胞肝癌中侵襲、轉(zhuǎn)移的作用,以及它在癌組織中的表達(dá)對(duì)于預(yù)測(cè)肝癌浸潤(rùn)轉(zhuǎn)移、惡性程度判斷是否有重要的提示作用。
   方法本文采用VP-9000免疫組化二步法,檢測(cè)70例肝癌組織及其癌旁組織中Snail、VEGF、MMP-9蛋白的表達(dá),采用RT-PCR,檢測(cè)40例新鮮肝癌組織及其

2、癌旁組織中Snail、VEGF、MMP-9mRNA的表達(dá),其中30例石蠟標(biāo)本選自該院2007-2009年行手術(shù)切除且術(shù)后經(jīng)病理診斷為原發(fā)性肝細(xì)胞肝癌病人,每例蠟塊均含有癌和癌旁組織。男性患者22例,女性8例。年齡36-77歲(中位年齡56.5歲)。HCC Edmondson病理分級(jí)Ⅰ級(jí)1例,Ⅱ級(jí)4例,Ⅲ級(jí)20例,Ⅳ級(jí)5例。40例新鮮肝癌組織于手術(shù)時(shí)取出,距腫瘤邊緣3~5cm切除癌旁組織,然后取無(wú)出血、壞死,生長(zhǎng)活躍的癌組織,分別于-70

3、℃冰箱內(nèi)保存,用于RT-PCR,剩余組織用40g/L多聚甲醛固定,石蠟包埋切片,用于免疫組織化學(xué)染色。
   結(jié)果免疫組化染色結(jié)果按染色強(qiáng)度的深淺積分(P),0分:無(wú)染色,1分:弱陽(yáng)性,2分:強(qiáng)陽(yáng)性。按著色細(xì)胞百分比(I),1分:0-25%,2分:26%-50%,3分51%-75%,4分:76%-100%,然后按照陽(yáng)性細(xì)胞×染色強(qiáng)弱計(jì)算總分,總分<3為陰性,≥3為陽(yáng)性。Snail主要表達(dá)于細(xì)胞核,肝癌組織中Snail的陽(yáng)性表達(dá)率

4、高于癌旁組織中(P<0.05),且癌組織中Snail陽(yáng)性表達(dá)率與包膜侵襲、門脈侵襲及肝內(nèi)轉(zhuǎn)移情況有關(guān)(P<0.05),VEGF主要分布在胞漿,肝癌組織中VEGF的陽(yáng)性表達(dá)率離子癌旁組織中(P<0.05),且癌組織中VEGF陽(yáng)性表達(dá)率與腫瘤直徑、門脈侵襲、包膜侵襲、肝內(nèi)轉(zhuǎn)移有關(guān)(P<0.05)。MMP-9主要分布在胞漿,肝癌組織中MMP-9的陽(yáng)性表達(dá)率高于癌旁組織中(P<0.05),且癌組織中MMP-9陽(yáng)性表達(dá)率與腫瘤直徑、門脈侵襲、包膜

5、侵襲、肝內(nèi)轉(zhuǎn)移有關(guān)(P<0.05)。Snail、VEGF及MMP-9在肝癌中的表達(dá)經(jīng)利用x2檢驗(yàn)分析,Snail與VEGF表達(dá)呈正相關(guān)(P<0.05):Snail與MMP-9呈正相關(guān)(P<0.05)。RT-PCR產(chǎn)物用1.5%瓊脂糖凝膠電泳并觀察拍照,擴(kuò)增產(chǎn)物有相應(yīng)特異性條帶,即為陽(yáng)性結(jié)果,肝癌組織中SnailmRNA的陽(yáng)性表達(dá)率高于癌旁組織(P<0.05),且癌組織中SnailmRNA的陽(yáng)性表達(dá)率與包膜侵襲、門脈侵襲情況有關(guān)(P<0.

6、05),而與肝內(nèi)轉(zhuǎn)移情況無(wú)關(guān)(P>0.05)肝癌組織中VEGFmRNA的陽(yáng)性表達(dá)率高于癌旁組織(P<0.05),且癌組織中SnailmRNA的陽(yáng)性表達(dá)率與包膜侵襲、門脈侵襲、肝內(nèi)轉(zhuǎn)移情況有關(guān)(p<0.05)。肝癌組織中MMP-9mRNA陽(yáng)性表達(dá)率高于癌旁組織(P<0.05),且癌組織中MMP-9mRNA的陽(yáng)性表達(dá)率與包膜侵襲、門脈侵襲、肝內(nèi)轉(zhuǎn)移情況有關(guān)(P<0.05)Snail、VEGF及MMP-9mRNA在肝癌中的表達(dá)經(jīng)利用x2檢驗(yàn)分

7、析,SnailmRNA與VEGFmRNA表達(dá)呈正相關(guān)(P<0.05);Snail mRNA與MMP-9mRNA呈正相關(guān)(P<0.05)。
   結(jié)論本實(shí)驗(yàn)采用免疫組化和PCR檢測(cè)肝癌及癌旁組織中Snail、VEGF、MMP-9 mRNA和蛋白的表達(dá),得出Snail、VEGF、MMP-9mRNA和蛋白均高表達(dá)于肝癌組織中,低表達(dá)于癌旁組織中。肝癌組織中Snail、VEGF、MMP-9蛋白的表達(dá)與腫瘤直徑、病理分級(jí)及腫瘤大體無(wú)關(guān)但與

8、包膜侵襲、門脈侵襲及肝內(nèi)轉(zhuǎn)移相關(guān),可見(jiàn)Snail、VEGF、MMP-9在肝癌的侵襲和轉(zhuǎn)移中發(fā)揮作用,Snail、VEGF、MMP-9蛋白的高表達(dá)增強(qiáng)了癌細(xì)胞惡性侵襲性,使其更易發(fā)生侵襲轉(zhuǎn)移。Snail在mRNA水平上與包膜侵襲、門脈侵襲相關(guān)但并未顯示出與肝內(nèi)轉(zhuǎn)移相關(guān),推測(cè)可能與樣本量較少有關(guān),也可能與Snail蛋白在翻譯水平上調(diào)或蛋白穩(wěn)定性增高有關(guān)。僅僅抑制E-cad的表達(dá)還不足以說(shuō)明Snail在腫瘤侵襲和轉(zhuǎn)移中的作用,在Snail傳導(dǎo)

9、通路中還有其它分子蛋白的參與,國(guó)外某些研究已表明VEGF是處于其上游的基因產(chǎn)物,誘導(dǎo)Snail基因的啟動(dòng)表達(dá),表達(dá)后的Snail又可進(jìn)一步調(diào)控其下游基因,如E-cadherin、MMP的表達(dá),Snail可上調(diào)MMPs的表達(dá),MMPs可降解細(xì)胞外基質(zhì)促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的轉(zhuǎn)移。這需要更多的研究來(lái)充分的了解Snail在HCCs中的作用和不同的靶基因。已有研究證實(shí)反義Snail轉(zhuǎn)錄因子能引起肝癌細(xì)胞體外侵襲、運(yùn)動(dòng)潛能下降,推測(cè)Snail居于信號(hào)通路級(jí)

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