還原型谷胱甘肽對腺嘌呤致大鼠腎小管-間質(zhì)損傷的保護作用.pdf

1、目的：觀察不同時間點下KIM-1在腺嘌呤致大鼠腎小管-間質(zhì)損傷模型中的表達情況、變化規(guī)律及意義。研究還原型谷胱甘肽對腺嘌呤致大鼠腎小管-間質(zhì)損傷的作用及其與KIM-1表達水平的關(guān)系，從而探討還原型谷胱甘肽治療腎小管-間質(zhì)損傷的可能作用機制，為腺嘌呤致大鼠腎小管-間質(zhì)損傷的臨床治療和藥物研發(fā)提供部分實驗依據(jù)。
　　方法：（1）清潔級健康成年雄性SD大鼠54只隨機分為三大組，S組（正常對照組）、M組（模型組）、T組（干預(yù)組），每大組1

2、8只。S組予蒸餾水10ml／(kg·d)灌胃，M組予2.5％腺嘌呤溶液250mg／(kg·d)灌胃，T組予2．5％腺嘌呤溶液250mg／(kg·d)灌胃并腹腔注射還原型谷胱甘肽100mg/(kg.d)。每組分別于造模后10天、20天、30天處死大鼠各6只。（2）每個時間點處死老鼠前心臟采血檢測血Scr、BUN、血KIM-1，處死當日留取清晨尿檢測尿KIM-1。（3）取大鼠一側(cè)腎臟磨碎后測定腎臟組織中KIM-1的濃度，另一側(cè)腎臟行HE染色

3、評估腎小管間質(zhì)損傷的程度。（4）應(yīng)用免疫組織化學方法檢測腎臟組織中 KIM-1的表達情況。
　　結(jié)果：(1)S組大鼠各時間點血Scr、BUN無明顯異常；M組大鼠明顯升高，與同期S組比較差異有顯著性(P<0.01)；T組大鼠明顯低于同期M組，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，但仍高于同期S組，差異有顯著性(P<0.01)。（2）S組大鼠各時間點血KIM-1、尿KIM-1、腎組織中KIM-1無明顯異常；M組大鼠明顯升高，與同期S組比較

4、差異有顯著性(P<0.01)；T組大鼠明顯低于同期M組，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，但仍高于同期S組，差異有顯著性(P<0.01)。(3)腎臟HE染色：S組大鼠各時間點腎小球、腎小管結(jié)構(gòu)正常；M組大鼠腎小管間質(zhì)損傷指數(shù)明顯升高，較同期S組比較差異有顯著性(P<0.01），腎臟組織于10天時已出現(xiàn)腎小管腫脹，腎小管上皮細胞脫落或空泡樣變性，腺嘌呤結(jié)晶沉積，炎性細胞浸潤。隨著時間延長，上述病理表現(xiàn)逐漸加重，30天末，高度擴張與萎縮的腎

5、小管并存，散在腎小管壞死、灶狀萎縮、囊性擴張或代償肥大，大量棕黑色的嘌呤代謝產(chǎn)物結(jié)晶沉積，在整個病變過程中腎小球病理改變不明顯；T組大鼠較同期M組比較腎臟組織病理損傷程度輕，腺嘌呤結(jié)晶沉積減少，腎小管間質(zhì)損傷指數(shù)減少，差異有顯著性(P<0.05）,但較同期S組比較腎小管間質(zhì)損傷指數(shù)仍明顯升高，差異有顯著性(P<0.01）。（4）腎臟免疫組化：光鏡下見S組大鼠腎臟中KIM-1表達極少，M組KIM-1表達量明顯增多，染色加深，主要位于皮髓交

6、界處腎小管上皮細胞胞質(zhì)頂端，隨時間的延長，KIM-1表達量減少，染色變淺，但與同期S組比較差異有顯著性(P<0.01)，T組KIM-1表達量較同期M組明顯減少，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，但較同期S組明顯增多，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。（5）相關(guān)性分析：在M組10天、20天、30天共三個時期16只大鼠中，血肌酐分別與血KIM-1、尿KIM-1、腎臟KIM-1含量及免疫組化腎臟KIM-1表達之間均呈負相關(guān)關(guān)系(相關(guān)系數(shù)分別為

7、r=-0.091、-0.223、-0.845、-0.035，P<0.01)；腎小管間質(zhì)損傷指數(shù)評分分別與血KIM-1、尿KIM-1、腎臟KIM-1含量及免疫組化腎臟KIM-1表達均呈負相關(guān)關(guān)系(相關(guān)系數(shù)分別為r=-0.858、-1.932、-7.265，P<0.01r=-0.295，P<0.05)；血肌酐與腎小管間質(zhì)損傷指數(shù)評分呈正相關(guān)(相關(guān)系數(shù)分別為r=0.903，P<0.01)。
　　結(jié)論：①KIM-1在腺嘌呤所致腎小管間質(zhì)損