香煙煙霧提取物誘導(dǎo)肺腺癌細(xì)胞侵襲增加與nm23-H1基因表達(dá)的相關(guān)研究.pdf

1、目的：觀察轉(zhuǎn)移抑制基因nm23-H1對(duì)經(jīng)香煙煙霧提取物處理的人肺腺癌細(xì)胞株A549侵襲能力的影響;并初步探討香煙煙霧提取物處理后A549細(xì)胞nm23-H1表達(dá)下調(diào)機(jī)制。
　　 方法：應(yīng)用含1％香煙煙霧提取物的培養(yǎng)液處理A54916周,16周細(xì)胞繼續(xù)給予脫毒培養(yǎng)8周,得到兩種處理后的細(xì)胞。應(yīng)用nm23-H1野生質(zhì)粒轉(zhuǎn)染上述兩種細(xì)胞,同時(shí)設(shè)置空質(zhì)粒轉(zhuǎn)染組及未轉(zhuǎn)染組作為對(duì)照,采用RT-PCR和western blot分別檢測(cè)六組細(xì)胞中

2、nm23-H1的mRNA轉(zhuǎn)錄和蛋白表達(dá)水平;Transwell小室及劃痕試驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞侵襲遷移能力;采用甲基化特異性PCR(MSP)檢測(cè)處理及未處理細(xì)胞的nm23-H1基因的甲基化水平。
　　 結(jié)果： RT-PCR和western blot結(jié)果均顯示轉(zhuǎn)染野生質(zhì)粒組細(xì)胞nm23-H1的mRNA轉(zhuǎn)錄和蛋白表達(dá)皆上調(diào),與其他組相比差異具有顯著性;Transwell小室及劃痕試驗(yàn)結(jié)果都表明轉(zhuǎn)染野生質(zhì)粒組細(xì)胞遷移能力降低,與其他組相比差異具