實(shí)驗(yàn)性心肌缺血及藥物干預(yù)的蛋白質(zhì)組學(xué)研究.pdf

1、缺血性心臟病(冠心病)是嚴(yán)重危害人類健康的主要疾病之一,其最基本的發(fā)病因素是由于冠狀動(dòng)脈口徑變窄(原因有冠脈痙攣、冠脈粥樣硬化、瘀血塊堵塞等),導(dǎo)致心肌營養(yǎng)血流量降低.氧自由基、能量饋乏、鈣超載、酸中毒和免疫損傷等因素在心肌缺血損傷中發(fā)揮重要作用.垂體后葉素(pit)誘導(dǎo)的心肌缺血?jiǎng)游锬Ｐ陀捎诓僮骱?jiǎn)便、可靠性好,在抗心肌缺血藥物研究中得到廣泛應(yīng)用.從所查文獻(xiàn)中未見有關(guān)該動(dòng)物模型缺血心肌蛋白質(zhì)組學(xué)研究的報(bào)道,而研究該動(dòng)物模型缺血心肌蛋白質(zhì)

2、組學(xué)變化規(guī)律,除可進(jìn)一步闡明缺血心肌的損傷機(jī)制外,還有助于闡明抗心肌缺血藥物(如消心痛、四逆湯)的機(jī)理.本研究擬達(dá)到以下目的:1.研究垂體后葉素誘導(dǎo)NIH小鼠缺血心肌的蛋白質(zhì)變化譜,為抗心肌缺血藥物研究建立基礎(chǔ);2.闡明消心痛、四逆湯等藥物干預(yù)缺血心肌的蛋白質(zhì)組學(xué)變化;3.從蛋白質(zhì)組學(xué)角度闡明四逆湯配伍規(guī)律,為中藥復(fù)方配伍規(guī)律研究探素一條新思路.實(shí)驗(yàn)方法:實(shí)驗(yàn)分為正常對(duì)照組、缺血模型組、消心痛組、四逆湯組、附子組、附子+干姜組、附子+甘

3、草組、干姜+甘草組共8組.正常組和模型組每天灌服蒸餾水,其余各組灌服相應(yīng)藥物,連續(xù)給藥5天后腹腔注射烏拉坦(2g/kg)麻醉,用BL-Century生物信號(hào)采集系統(tǒng)監(jiān)測(cè)小鼠心電圖,腹腔注射垂體后葉素(20u/kg),50min后快速取左心室肌組織,用預(yù)冷心肌清洗液沖洗去血漬,保存于液氮待測(cè).提取心肌總蛋白質(zhì),采用Bradford法定量總蛋白質(zhì)含量.利用二維等電聚焦電泳分離總蛋白質(zhì),考馬斯亮蘭染色,PDQuest7.1.1圖像分析軟件分析