肝細胞生長因子對大鼠供心保存的保護作用的實驗研究.pdf

1、目的:研究肝細胞生長因子對大鼠供心長時間保存的保護作用并探討其可能作用機制。 方法:40只SD大鼠隨機分為對照組：A組、B組和實驗組：C組、D組，每組10只。健康SD大鼠開胸后迅速取出心臟，將心臟掛于Langendorff灌注裝置上，主動脈根部灌注37℃、pH值7.4、經(jīng)95％的O<,2>及5％CO<,2>混合氣飽和的KH緩沖液。經(jīng)左心耳，左心房，左房室瓣將連有壓力傳感器的測壓管送入左心室,壓力傳感器與RM6240B多道生理信號

2、采集處理系統(tǒng)連接測定心室血流動力學(xué)指標(biāo)。10分鐘后關(guān)閉主動脈灌注，開放左房灌注管，轉(zhuǎn)入Neely左心做功，收集冠脈流出液5分鐘。對照組和實驗組分別用HTK液和rh-HGF+HTK液作為心臟停跳液，待心臟停跳后，分別置于HTK保存液和rh-HGF+HTK保存液中，4℃分別保存8h(A組，C組)和12h(B組，D組)。于各時間段將心臟重新置于Langendorff裝置上灌注，灌注條件同保存前保持一致。通過檢測保存前后的血流動力指標(biāo)的恢復(fù)率；

3、測定CSF，冠脈流出液中心肌酶CK、LDH，內(nèi)皮功能No、ET的變化；TUNEL法檢測心肌細胞凋亡指數(shù)AI：免疫組化檢測受體c-met的表達和RT-PCR法檢測心肌組織bcl-2mRNA的表達水平。 結(jié)果:各時間段與對照組比較，實驗組血流動力學(xué)指標(biāo)恢復(fù)較好，心肌病理損傷減輕；冠脈流出液中CK，LDH含量降低，No活性提高；ET活性降低；心肌組織中c-met表達升高：凋亡指數(shù)降低;心肌組織bcl-2 mRNA的表達升高。