阿霉素對(duì)乳鼠心肌細(xì)胞TLR4-NF-κB信號(hào)通路的影響及地塞米松的干預(yù)實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：觀察阿霉素(Adriamycin，ADR)對(duì)乳鼠心肌細(xì)胞Toll樣受體4(Toll-likereceptor4,TLR4)、核因子-κB(Nuclearfactor-kappaB,NF-κB)、腫瘤壞死因子-a(Tumornecrosisfactor-alpha，TNF-a)表達(dá)的影響，探討阿霉素在心肌損傷中的可能發(fā)病機(jī)制及地塞米松(Dexamethasone，DXM)對(duì)阿霉素心肌細(xì)胞損傷的干預(yù)作用。 方法：采用體外培養(yǎng)乳

2、鼠心肌細(xì)胞，用阿霉素制備心肌細(xì)胞損傷模型。將培養(yǎng)乳鼠心肌細(xì)胞隨機(jī)分為三組：(1)對(duì)照組：將心肌細(xì)胞懸液換用無(wú)血清培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)未加任何藥物；(2)ADR組：在培養(yǎng)液中加入阿霉素1mg/L；(3)DXM+ADR組：在加入ADR1mg/L前30分鐘給予地塞米松32mg/L。分別作用2小時(shí)、6小時(shí)、24小時(shí)，免疫組織化學(xué)法檢測(cè)心肌細(xì)胞TLR4、TNF-a蛋白表達(dá)；用Westernblot法對(duì)TLR4、NF-κB、TNF-a在心肌細(xì)胞的表達(dá)水平

3、進(jìn)行半定量分析；比色法測(cè)定培養(yǎng)液中乳酸脫氫酶(Lactatedehydrogenase，LDH)的活性。 結(jié)果：ADR組心肌細(xì)胞TLR4、NF-κB、TNF-a表達(dá)較對(duì)照組明顯增加(p<0.01)；DXM+ADR組心肌細(xì)胞TLR4、NF-κB、TNF-a表達(dá)水平低于ADR組(p<0.01)。LDH的活性：與對(duì)照組比較，ADR組的LDH活性明顯增高(135.8±5.44v80.8±3.83u/L，p<0.01，6h組)；與ADR組

4、比較，DXM+ADR組的LDH活性明顯降低(98.8±6.09v135.8±5.44u/L，p<0.01，6h組)；與對(duì)照組比較，DXM+ADR組的LDH活性稍高(98.8±6.09v80.8±3.83u/L，p<0.05，6h組)。 結(jié)論：本研究顯示阿霉素作用于鼠心肌細(xì)胞，導(dǎo)致心肌細(xì)胞TLR4過(guò)度表達(dá)，激活其下游信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)系統(tǒng)，表達(dá)細(xì)胞因子TNF-a，是其心肌細(xì)胞損傷的機(jī)制之一；DXM可以干預(yù)阿霉素心肌細(xì)胞TLR4及其下游信號(hào)轉(zhuǎn)