可溶性B7-H4和蛋白質(zhì)譜在腫瘤實(shí)驗(yàn)診斷中的應(yīng)用研究.pdf

1、目的:應(yīng)用表面增強(qiáng)激光解析電離飛行時(shí)間質(zhì)譜(SELDI-TOF-MS)技術(shù)，檢測(cè)和比較肺腺癌組與正常對(duì)照組血清蛋白質(zhì)(群)的差異，尋找肺腺癌早期診斷的蛋白質(zhì)標(biāo)志物，探討其應(yīng)用價(jià)值。 應(yīng)用ELISA法檢測(cè)和評(píng)價(jià)食管癌患者血清可溶性B7-H4(sB7-H4)的表達(dá)及其診斷價(jià)值。 方法:第一部分：收集肺腺癌患者31例，性別、年齡、抽煙情況(抽煙量和抽煙時(shí)間)相匹配的健康人31例，術(shù)前或清晨空腹采血。SAX-2芯片捕獲血清蛋白質(zhì)

2、，用SELDI-TOF-MS技術(shù)，分別獲得兩組的血清蛋白質(zhì)質(zhì)譜圖，應(yīng)用生物信息學(xué)技術(shù)對(duì)其作對(duì)比分析，篩選用于肺腺癌早期診斷的蛋白質(zhì)標(biāo)志物。 第二部分：采用ELISA法檢測(cè)分析46例食管癌患者和35例健康對(duì)照者血清sB7-H4和CEA含量，利用受試者工作特性曲線(ROC)和曲線下面積(AUC)，比較血清sB7-H4和CEA兩者的診斷效率。分析sB7-H4作為新免疫標(biāo)志分子對(duì)食管癌的診斷價(jià)值。 結(jié)果:第一部分：在肺腺癌和對(duì)照

3、組血清中，在分子量3000-20000Da范圍內(nèi)共檢測(cè)到202個(gè)蛋白峰，用BiomarkerWizard軟件比較肺腺癌和對(duì)照組血清蛋白質(zhì)譜，發(fā)現(xiàn)102個(gè)蛋白峰有明顯差異，102個(gè)蛋白峰的p值范圍為4.47E-42～0.000907。將差異蛋白峰導(dǎo)出后用Rweka軟件工具建立決策樹，結(jié)果發(fā)現(xiàn)由于p值極小，在決策樹模型中僅只需蛋白峰為m/z14022.9的一個(gè)差異蛋白質(zhì)就可獲得對(duì)肺腺癌診斷正確率達(dá)98.387±0.127％(4倍交叉證實(shí))，

4、從12個(gè)樣本的盲測(cè)結(jié)果證實(shí)其對(duì)肺腺癌診斷的正確率、靈敏度、特異度均為100％。p值比m/z14022.9略大一點(diǎn)的m/z3735.99也有近似的結(jié)果：對(duì)肺腺癌診斷的正確率可達(dá)98±0.1414％，盲測(cè)結(jié)果為100％。 第二部分：與健康對(duì)照相比，食管癌患者血清中sB7-H4顯著升高(p<0.001)，其在食管癌診斷中的靈敏度(93％)和準(zhǔn)確性(87％)均顯著高于CEA。 結(jié)論:第一部分：應(yīng)用SELDI-TOF-MS技術(shù)獲得