ADAMTS-1在大鼠肺纖維化組織中的表達及苦參素的干預(yù)作用.pdf

1、目的：探討含I型血小板結(jié)合蛋白基序的解聚素樣基質(zhì)金屬蛋白酶（ADAMTS-1）在大鼠肺纖維化組織中表達的動態(tài)變化以及苦參素的干預(yù)效果，闡明ADAMTS-1參與肺纖維化的分子機制及苦參素抗肺纖維化的機制。
　　方法：60只SD大鼠隨機分成4組，即對照組、模型組、低劑量(50mg/kg)苦參素干預(yù)組，高劑量(100mg/kg)苦參素干預(yù)組。每組15只，各組分別于第7、14、和28天處死5只大鼠，采用HE染色、Masson三聯(lián)染色檢測肺

2、纖維化的程度，用免疫組化和RT-PCR分別測定肺組織ADAMTS-1、I型膠原（COLI）的蛋白及mRNA水平。
　　結(jié)果：
　　1、HE染色、Masson三聯(lián)染色
　　HE染色：對照組大鼠肺泡結(jié)構(gòu)正常、清晰，未見肺泡間隔增寬及異常的膠原沉積。肺纖維化模型組大鼠第7天表現(xiàn)為明顯的急性炎癥期，可見大量炎性細胞浸潤；14天時肺間隔明顯增寬，膠原沉積增多及斑片狀的纖維化改變；28天可見大量增生斑片狀膠原纖維，肺組織結(jié)構(gòu)紊亂，

3、少許炎性細胞浸潤，穩(wěn)定的肺纖維化形成。
　　Masson染色：膠原纖維呈現(xiàn)藍綠色，14天及28天可見大量的膠原纖維聚集及沉積。對照組大鼠支氣管壁及肺間質(zhì)局部可見散在的膠原纖維。而高劑量苦參素干預(yù)組比低劑量苦參素干預(yù)組及模型組膠原纖維的聚集沉積明顯有所減輕，低劑量苦參素干預(yù)組與模型組相比膠原纖維的分布及量略少。
　　2. HYP含量檢測
　　隨著肺纖維化模型建造時間的遞增HYP含量越高，模型組HYP含量與對照組相比差異有

4、顯著性（P<0.05），與低劑量苦參素組相比差異無顯著性（P＞0.05），與高劑量苦參素組相比差異有顯著性（P<0.05）。
　　3.ADAMTS-1蛋白在肺纖維化中的表達
　　ADAMTS-1在模型組各時間點均表達，其表達量隨著時間的遞增呈逐漸下降趨勢；在低劑量苦參素組干預(yù)組及高劑量苦參素干預(yù)組第7天、14天、28天均表達，隨著時間的遞增，劑量增高，其表達逐漸升高的趨勢。模型組與對照組相比ADAMTS-1表達呈顯著下降，差

5、異有顯著性（P<0.05）;模型組與低劑量苦參素干預(yù)組相比，雖然后者ADAMTS-1雖有增高，但無顯著差異性（P>0.05）；模型組與高劑量苦參素干預(yù)組比，后者ADAMTS-1表達顯著增高，差異有顯著性（P<0.05）;高劑量苦參素與低劑量苦參素組對比，差異有顯著性（P<0.05）;低劑量苦參素組于對照組相比，差異有顯著性（P<0.05）。
　　4.肺纖維化組織RT-PCR檢測ADAMTS-1及COLI mRNA的表達
　　

6、ADAMTS-1mRNA在對照組表達最高，模型組各時間點ADAMTS-1mRNA表達水平顯著低于對照組（P<0.05）,高劑量苦參素干預(yù)組ADAMTS-1mRNA表達水平較模型組增加（P<0.05），但仍低于對照組（P<0.05），然而低劑量苦參素組與模型組比較差異無顯著性（P>0.05）。COLI mRNA在模型組7天，14天、28天時均有表達，各組及各時間點間表達均差異有顯著性（P<0.05）；同時與對照組相比差異有顯著性（P<0.