發(fā)酵飼料對(duì)黑水虻生長(zhǎng)性能的影響及黑水虻消化酶活和腸道菌群的特征研究.pdf

1、黑水虻（Hermetia illucens L.）是一種腐生性的水虻科資源昆蟲(chóng)。黑水虻原產(chǎn)于美洲，目前已經(jīng)廣泛分布于全世界，主要分布在南北緯40度之間。近些年我國(guó)開(kāi)展了黑水虻研究，結(jié)果發(fā)現(xiàn)黑水虻分布于我國(guó)廣西、廣東、云南、臺(tái)灣、湖南和湖北等地。
　　黑水虻幼蟲(chóng)可以處理禽畜糞便和餐廚垃圾；而且黑水虻幼蟲(chóng)本身含較高比例的蛋白質(zhì)、粗脂肪等，可以作為高質(zhì)量的動(dòng)物蛋白和能量飼料。研究并利用黑水虻對(duì)解決人類(lèi)目前所面臨的環(huán)境污染和資源短缺問(wèn)題有

2、重要的意義。
　　本課題以黑水虻為研究對(duì)象，通過(guò)復(fù)合菌發(fā)酵處理豬飼料、餐廚余、豬糞作為昆蟲(chóng)飼料養(yǎng)殖4日齡的幼蟲(chóng)，進(jìn)而研究復(fù)合菌發(fā)酵昆蟲(chóng)飼料對(duì)黑水虻幼蟲(chóng)存活率、幼蟲(chóng)歷期、幼蟲(chóng)平均增重、料重比、轉(zhuǎn)化率、蛹羽化率的影響。采用 Folin-酚法和碘-淀粉比色法分別確定黑水虻幼蟲(chóng)消化酶活的最佳測(cè)定方法，研究飼料的滅菌處理以及幼蟲(chóng)的消毒處理對(duì)黑水虻幼蟲(chóng)消化酶酶活的影響。利用16S rRNA基因測(cè)序技術(shù)，檢測(cè)分析飼料的滅菌處理以及幼蟲(chóng)的消毒處理

3、對(duì)黑水虻幼蟲(chóng)腸道菌群的影響。
　　結(jié)果如下：
　?。?）發(fā)酵豬飼料將幼蟲(chóng)存活率提高5.34％（p<0.05），發(fā)酵餐廚余對(duì)幼蟲(chóng)存活率無(wú)影響（p>0.05），預(yù)發(fā)酵豬糞會(huì)降低幼蟲(chóng)存活率（p<0.05）；發(fā)酵餐廚余和豬糞養(yǎng)殖的幼蟲(chóng)平均增重分別提高了0.0190 g、0.0813 g（p<0.05）；發(fā)酵豬飼料、餐廚余、豬糞均能降低料重比（p<0.05），分別降低0.426、0.272和0.163。發(fā)酵豬飼料和餐廚余均能顯著提高飼

4、料的轉(zhuǎn)化率（p<0.05），分別提高了0.066、0.116，但發(fā)酵豬糞的轉(zhuǎn)化率無(wú)影響（p>0.05）。發(fā)酵豬飼料、餐廚余、豬糞還能提高黑水虻成蟲(chóng)羽化率（p<0.05），分別為8.58%、21.03%、15.43%。
　?。?）測(cè)定黑水虻幼蟲(chóng)蛋白酶活性最佳方法：取1.0 mL粗酶液在1.0 mL酪蛋白溶液濃度為2%（w:v），反應(yīng)溫度為40℃，磷酸氫二鈉-磷酸二氫鈉緩沖液（pH7.0）濃度為0.05 mol/L的條件下反應(yīng)5 mi

5、n，加2.0 mL三氯乙酸(0.4 mol/L)終止反應(yīng)，然后用Folin-酚法在紫外分光光度計(jì)波長(zhǎng)680 nm處測(cè)定OD值。黑水虻幼蟲(chóng)蛋白酶活達(dá)到193.82 U/mL。
　?。?）測(cè)定黑水虻幼蟲(chóng)淀粉酶活性最佳方法：取0.5 mL粗酶液在0.1 mL淀粉溶液濃度為3%（w:v），反應(yīng)溫度為40℃，磷酸氫二鈉-磷酸二氫鈉緩沖液（pH7.0）濃度為0.05 mol/L的條件下反應(yīng)8 min，然后用碘-淀粉法在紫外分光光度計(jì)波長(zhǎng)660

6、 nm波長(zhǎng)下測(cè)OD值。淀粉酶活達(dá)到591.25 U/mL。
　　（4）黑水虻幼蟲(chóng)的蛋白酶活性大小與飼料種類(lèi)有關(guān)（p<0.05），豬飼料組幼蟲(chóng)蛋白酶活性較大，同種飼料的滅菌處理和幼蟲(chóng)的消毒處理無(wú)明顯影響（p>0.05）。幼蟲(chóng)的淀粉酶活性與飼料種類(lèi)和幼蟲(chóng)消毒處理有關(guān)（p<0.05），豬飼料組幼蟲(chóng)淀粉酶活性較高，同時(shí)幼蟲(chóng)不消毒處理淀粉酶活性較大。
　　（5）黑水虻幼蟲(chóng)腸道菌群的種類(lèi)數(shù)量與飼料的滅菌與否有關(guān)，飼料不滅菌的黑
　

7、　水虻幼蟲(chóng)腸道微生物種類(lèi)較多。摩根氏菌屬（Morganella）為SF-m-1、SF-m-2、SF-m-3、SF-m-4、SF-p-1、SF-p-4六個(gè)處理樣品的黑水虻腸道的主要菌，所占比例分別為
　　92.05%、90.65%、66.68%、97.31%、94.04%、27.91%。腸球菌屬（Trabulsiella）在樣品SF-p-2、SF-p-3中所占比例較大，分別為40.80%、25.83%。
　　結(jié)論：本研究說(shuō)明復(fù)