CDH4基因真核表達(dá)載體的構(gòu)建及其在鼻咽癌中的功能研究.pdf

1、CDH4基因編碼的R-Cadherin是鈣粘蛋白家族成員之一，近年來(lái)發(fā)現(xiàn)CDH4有可能在胃腸道腫瘤中是一個(gè)候選腫瘤抑制基因。我們?cè)诒狙芯拷M的前期實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)CDH4基因在鼻咽癌細(xì)胞系CNE1、CNE2、TW03、C666中表達(dá)沉默，而在正常鼻咽癌細(xì)胞系NP69中高表達(dá)；在NPC細(xì)胞系中均可以檢測(cè)到CDH4的啟動(dòng)子區(qū)甲基化，且用甲基化轉(zhuǎn)移酶抑制劑5-Aza-dC可以使細(xì)胞系中CDH4重新表達(dá)。鼻咽癌組織中CDH4的轉(zhuǎn)錄表達(dá)水平顯著低于正常鼻

2、咽組織中的水平；CDH4基因啟動(dòng)子甲基化可在90％的鼻咽癌組織中檢測(cè)到，在正常鼻咽上皮細(xì)胞株及正常鼻咽組織中則全為非甲基化。為明確CDH4在鼻咽癌中的作用，我們從CDH4高表達(dá)的正常腦組織中克隆出CDH4基因，構(gòu)建其真核表達(dá)載體，將其轉(zhuǎn)染至不表達(dá)CDH4的鼻咽癌細(xì)胞株并篩選獲得了穩(wěn)定轉(zhuǎn)染CDH4的鼻咽癌細(xì)胞株。轉(zhuǎn)染后細(xì)胞的生長(zhǎng)抑制實(shí)驗(yàn)、克隆形成實(shí)驗(yàn)、遷移運(yùn)動(dòng)試驗(yàn)、劃痕熒光染料示蹤試驗(yàn)的結(jié)果顯示，CDH4可抑制鼻咽癌細(xì)胞生長(zhǎng)，降低鼻咽癌細(xì)