JNK2和SHH在食管癌變過程中的動(dòng)態(tài)表達(dá).pdf

1、背景與目的；食管鱗癌是常見的消化道惡性腫瘤之一，其在世界范圍內(nèi)的發(fā)病率和死亡率分別位于惡性腫瘤的第8位和第6位。降低食管癌患者死亡率的關(guān)鍵是早期發(fā)現(xiàn)、早期診斷、早期治療。因此，研究食管癌發(fā)生發(fā)展過程中的早期分子事件，尋找可用于食管癌篩查和早期診斷的分子標(biāo)志，成為當(dāng)前食管癌研究領(lǐng)域的熱點(diǎn)之一，對認(rèn)識(shí)食管癌的發(fā)生發(fā)展具有重要意義。JNK2是c-Jun氨基末端激酶(c-Jun N-terminal kinase,JNK)信號(hào)通路家族成員之一，

2、在人體內(nèi)廣泛存在，對細(xì)胞內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定及腫瘤細(xì)胞的生長有著一定的作用。SHH是Hedgehog信號(hào)通路家族中一員，是Hedgehog信號(hào)通路在發(fā)育過程中運(yùn)用最多的一種，位于7q36，編碼一種分泌蛋白，是與生長發(fā)育密切相關(guān)的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)因子，主要表達(dá)于內(nèi)胚層上皮層，在胚胎發(fā)育、組織分化和多種腫瘤發(fā)生發(fā)展中起著重要的作用。本研究擬從蛋白水平觀察JNK2和SHH在同一個(gè)體食管癌發(fā)生過程中的表達(dá)及動(dòng)態(tài)變化，探討兩者在不同階段表達(dá)的相互關(guān)系，為食管癌早期

3、診斷提供可參考的分子指標(biāo)。 材料和方法： 標(biāo)本來源：本實(shí)驗(yàn)所用的組織標(biāo)本分兩部分：一部分為49例，包括內(nèi)鏡活檢早期癌標(biāo)本19例，食管鱗狀上皮異型增生20例，正常組織10例。另一部分為安陽市腫瘤醫(yī)院在食管癌高發(fā)現(xiàn)場取自同一個(gè)體、相同食管病變部位在兩年前后的食管黏膜活檢組織標(biāo)本：選擇其中兩年后復(fù)查發(fā)展為原位癌的17例病人的兩次內(nèi)鏡活檢標(biāo)本作為癌變組，40例二年后復(fù)查仍處于異型增生狀態(tài)者的兩次內(nèi)鏡活檢標(biāo)本作為非癌變組。另選取同

4、一現(xiàn)場健康個(gè)體食管正常黏膜活檢蠟塊20例作為正常對照組。 方法 (1)應(yīng)用免疫組織化學(xué)S-P法分別檢測JNK2和SHH在兩部分標(biāo)本各組病變的表達(dá)情況，分析兩個(gè)指標(biāo)在癌變組和非癌變組的動(dòng)態(tài)表達(dá)變化。 (2)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析采用SPSS10．0統(tǒng)計(jì)軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行x<'2>檢驗(yàn)(Fisher′s精確概率檢驗(yàn)法)，兩指標(biāo)表達(dá)問采用列聯(lián)表相關(guān)分析。以α=0.05作為檢驗(yàn)水準(zhǔn)。 結(jié)果 (1)JNK2蛋白的表達(dá)： 在

5、第一部分標(biāo)本中JNK2在正常食管黏膜組織、食管鱗狀上皮異型增生組織、早期癌組織中的表達(dá)率分別為20％(2/10)、25％(5/20)、63.16％(12/19)，早期癌表達(dá)率顯著高于異型增生及正常組織，有顯著性差異(P<0.05)。異型增生和正常食管組織中表達(dá)無顯著性差異(P>0.05)。 在第二部分標(biāo)本中的表達(dá)情況：①按JNK2表達(dá)程度進(jìn)行分析，第一次活檢癌變組、非癌變組以及正常對照組的表達(dá)率分別為23.53％、25.00％、

6、20.00％，三者相比無明顯差異(P>0.05)，兩年后癌變組陽性表達(dá)率為64.71％，明顯高于非癌變組和正常對照組，有顯著性差異(P<0.05)，后兩者比較無顯著性差異(P>0.05)。②前后兩年相比癌變組JNK2表達(dá)率升高，有顯著性差異(P<0.05)，非癌變組表達(dá)率降低，但無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。③JNK2表達(dá)動(dòng)態(tài)變化(+～+，-～-，-～+，+～-)，在癌變組分別為23.58％(4/17)、35.94％(6/17)、40.

7、48(7/17)和0％(0.17)，非癌變組分別為7.50％(3/40)、62.50％(25/40)、12.50％(5/40)和17.50％(7/40)，兩組比較有顯著性差異(P<0.05)，其中由陰性轉(zhuǎn)為陽性狀態(tài)的癌變組高于非癌變組，有顯著性差異(P<0.05)，由陽性轉(zhuǎn)為陰性狀態(tài)的癌變組低于非癌變組，無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。 (2)SHH蛋白的表達(dá)： 在第一部分標(biāo)本正常食管黏膜組織、食管鱗狀上皮異型增生組織、早

8、期癌中的陽性率分別為30％(3/10)、45％(9/20)、73.68％(14/19)，早期癌表達(dá)率顯著高于異型增生及正常組織，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。異型增生和正常組織表達(dá)無顯著性差異(P>0.05)。 在第二部分標(biāo)本中的表達(dá)情況：①按SHH表達(dá)程度進(jìn)行分析，第一次活檢癌變組、非癌變組以及正常對照組的表達(dá)率分別為29.41％、15.00％、25.00％，三者相比無明顯差異(P>0.05)，兩年后癌變組陽性表達(dá)率為7

9、0.59％，明顯高于非癌變組和正常對照組，有顯著性差異(P<0.05)，后兩者比較無顯著性差異(P>0.05)。②前后兩年相比癌變組SHH表達(dá)率升高，有顯著性差異(P<0.05)，非癌變組表達(dá)率降低，但無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。③SHH表達(dá)動(dòng)念變化(+～+，-～-，-～+，+～-)，在癌變組分別為29.41％(5/17)、29.41％(5/17)、40.48％(7/17)和0％(0/17)，非癌變組分別為0.00％(0/40)、75

10、.00％(30/40)、10.00％(4/40)和15.00％(6/40)，兩組之間比較有顯著性差異(P<0.05)，其中由陰性轉(zhuǎn)為陽性狀態(tài)的癌變組高于非癌變組，有顯著性差異(P<0.05)，由陽性轉(zhuǎn)為陰性狀態(tài)的癌變組低于非癌變組，無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。 (3)兩部分實(shí)驗(yàn)相關(guān)性分析表明JNK2和SHH在異型增生及早期癌的表達(dá)無明顯相關(guān)(P>0.05)。 結(jié)論 1．與正常食管組織相比，JNK2和SHH蛋白在食管異型

11、增生組織和早期癌中表達(dá)升高。隨著異型增生向早期癌的轉(zhuǎn)變，JNK2和SHH表達(dá)率進(jìn)一步升高，提示JNK2和SHH高表達(dá)可能是食管癌發(fā)生的早期事件。 2．對JNK2和SHH動(dòng)態(tài)表達(dá)變化分析結(jié)果顯示，JNK2和SHH在食管癌發(fā)生和癌變過程可能起著重要的作用。 3．用列聯(lián)表分析兩部分實(shí)驗(yàn)中各組的JNK2和SHH表達(dá)結(jié)果無明顯相關(guān)，但對JNK2和SHH動(dòng)態(tài)觀察發(fā)現(xiàn)JNK2和SHH的表達(dá)有一致性提示JNK2和SHH可能有一定的相關(guān)，