慢性乙型肝炎患者血液流變學(xué)與樹突狀細(xì)胞的研究.pdf

1、目的：觀察慢性乙型肝炎患者血液流變學(xué)狀態(tài)和外周血單個(gè)核細(xì)胞來源的樹突狀細(xì)胞數(shù)量及表型的變化，分析血液流變學(xué)指標(biāo)和樹突狀細(xì)胞之間的關(guān)系，以揭示二者在慢性乙型肝炎發(fā)生和發(fā)展過程中的作用，更好的指導(dǎo)臨床治療。 對(duì)象與方法：健康對(duì)照組21例，年齡19-48歲，平均(34.6±4.9)歲，其中男性12例女性9例，均為身體健康者。37例慢性乙肝患者，為2005年5-8月在山東大學(xué)齊魯醫(yī)院肝病門診就診患者。年齡18-61歲，平均(36.5±

2、5.2)歲。其中男性23例女性14例，均符合2000年9月西安全國(guó)第十次病毒性肝炎及肝病學(xué)術(shù)會(huì)議修訂的病毒性肝炎診斷標(biāo)準(zhǔn)。所選患者均排除了合并其它病毒感染且未有其他系統(tǒng)疾病，半年內(nèi)未用過免疫調(diào)節(jié)劑。取空腹靜脈血20ml，其中5ml采用北京世帝儀器公司生產(chǎn)的R-80血液粘度儀進(jìn)行血液流變學(xué)指標(biāo)的測(cè)定，另15ml靜脈血以PBS對(duì)倍稀釋后，用人淋巴細(xì)胞分離液分離出PBMC，將獲取的：PBMC用RPMI 1640培養(yǎng)液調(diào)整細(xì)胞濃度為1×10<'

3、7>/L鋪入六孔培養(yǎng)板，置于37℃、5％CO<,2>培養(yǎng)箱中孵育2小時(shí)后吸棄未貼壁細(xì)胞。在貼壁細(xì)胞中加入適當(dāng)濃度的GM—CSF和IL-4繼續(xù)培養(yǎng)，每天觀察細(xì)胞形態(tài)的變化，隔日半量換液，第五天時(shí)加入TNF-a，第七天收懸浮細(xì)胞，計(jì)數(shù)，單抗標(biāo)記DC上流式細(xì)胞儀測(cè)定CD83、CD86的表達(dá)水平，并取部分細(xì)胞用3％戊二醛固定后送電鏡室制備成透射電鏡標(biāo)本，觀察DC的超微結(jié)構(gòu)。應(yīng)用t檢驗(yàn)分析慢性乙肝組與正常對(duì)照組之間各指標(biāo)的差異，用直線相關(guān)分析分析

4、血液流變學(xué)指標(biāo)與DC數(shù)量和表型之間的關(guān)系。結(jié)果： 1．血液流變學(xué)指標(biāo)的比較：與正常對(duì)照組比較，慢性乙肝組全血低切粘度明顯升高(P<0.05)，血漿粘度、紅細(xì)胞聚集指數(shù)均有明顯升高(P<0.05)。 2．單個(gè)核細(xì)胞誘導(dǎo)的DC數(shù)量及表型的比較：與正常對(duì)照組比較，慢性乙肝組誘導(dǎo)出的DC數(shù)量及共刺激分子CD83、CD86的表達(dá)均明顯降低 (P<0.05)。 3．DC形態(tài)的觀察：培養(yǎng)第七天時(shí)，正常人的DC體積較

5、前明顯增大，形狀不規(guī)則，邊緣出現(xiàn)多個(gè)大小不等的毛刺，呈典型的成熟DC的形態(tài)，而慢性乙型肝炎患者的DC在培養(yǎng)過程中出現(xiàn)的集落較小，體積比正常人的DC稍小，突起亦較少。 4．直線相關(guān)分析血液流變學(xué)指標(biāo)與DC數(shù)量、表型的關(guān)系：慢性乙型肝炎患者各血液流變學(xué)指標(biāo)與DC數(shù)量、DC表面分子CD83、CD86之間無明顯相關(guān)關(guān)系。 結(jié)論： 1．在慢性乙型肝炎患者體內(nèi)存在血液流變學(xué)狀態(tài)改變和微循環(huán)障礙，在進(jìn)行常規(guī)治療的同時(shí)予以活血