卵巢上皮性癌組織中HGF、IGF-Ⅰ及MMP-2的表達.pdf

1、卵巢癌(ovarian cancer)是婦科惡性腫瘤中死亡率最高的一類腫瘤，各種年齡均可發(fā)病。其中上皮性卵巢腫瘤占原發(fā)性卵巢腫瘤的50％～70％，其惡性類型占卵巢惡性腫瘤的85％～90％。因卵巢癌臨床早期無癥狀，并且缺乏有效的早期診斷方法，所以70％的病例在確診時已屬于中晚期，手術(shù)的效果不理想或已經(jīng)喪失手術(shù)時機；術(shù)后接受化療5年生存率也僅30％～40％。而侵襲、轉(zhuǎn)移及新生血管形成是卵巢癌最重要的生物學(xué)特征之一，也是卵巢癌患者治療失敗和死

2、亡的直接原因。
　　 肝細胞生長因子(hepatocyte growth factor，HGF)又稱擴散因子(scatterfactor，SF)，是一種多效性生長因子，由間質(zhì)細胞所分泌。最初僅被認為是肝細胞增殖的有絲分裂原之一，以后逐漸發(fā)現(xiàn)它具有促進腫瘤發(fā)展的多種功能，表現(xiàn)為刺激多種類型細胞的增殖、分化、侵襲和形態(tài)形成等多功能生物學(xué)效應(yīng)，并參與胚胎發(fā)生、創(chuàng)傷愈合、器官再生、及炎癥等多種病理生理過程。研究發(fā)現(xiàn)，在許多腫瘤組織中?？?/p>

3、測得HGF的過度表達，通過破壞細胞間的連接，刺激癌細胞浸潤，誘導(dǎo)腫瘤新生血管生長，從而參與多種腫瘤細胞的惡性生物學(xué)行為。
　　 胰島素樣生長因子(insulin-like growth factor，IGF)具有胰島素樣促代謝作用，具有極強的促有絲分裂作用，是許多正常和腫瘤細胞凋亡的抑制物。IGF-Ⅰ是IGF系統(tǒng)中的一類多肽類生長因子，最初被稱為促生長因子(Sm-c)，大部分由肝臟產(chǎn)生，分布廣泛。具有促進有絲分裂，刺激RNA和D

4、NA的合成而促進細胞增殖和/或抑制細胞凋亡；誘導(dǎo)細胞內(nèi)原癌基因的表達，啟動細胞增殖分裂過程，促進癌細胞的生長并增強惡性腫瘤的侵襲力。
　　 基質(zhì)金屬蛋白酶-2(matrix metalloproteinase-2，MMP-2)是Ⅳ型膠原酶的一種，以非活性形式由腫瘤組織產(chǎn)生，是腫瘤浸潤和轉(zhuǎn)移的主要因素，能促進腫瘤新生血管的形成；腫瘤細胞通過分泌MMP-2，從而降解腫瘤細胞周圍的細胞外基質(zhì)和基底膜，增強腫瘤細胞的侵襲及轉(zhuǎn)移能力，影響

5、著腫瘤的生物學(xué)行為，同時腫瘤細胞分泌的MMP-2可以降解毛細血管內(nèi)皮層下的基底膜和細胞外基質(zhì)，使內(nèi)皮細胞向外遷移并增殖，最終形成新的血管和基底膜。
　　 目的
　　 本研究采用免疫組織化學(xué)SP法檢測正常卵巢組織、卵巢良性上皮性腫瘤組織和卵巢上皮性癌組織中HGF、IGF-Ⅰ及MMP-2蛋白的表達，分析三者與卵巢上皮性癌細胞生物學(xué)特性間的關(guān)系，探討其在卵巢癌發(fā)生發(fā)展中的作用。
　　 材料與方法
　　 1材料：

6、收集鄭州大學(xué)第三附屬醫(yī)院和河南省腫瘤醫(yī)院自2008年7月～2009年5月行手術(shù)切除的卵巢組織共110例，所有標(biāo)本都經(jīng)10％的中性福爾馬林固定，常規(guī)脫水，石蠟包埋。其中正常卵巢組織20例，卵巢良性上皮性腫瘤組織30例(其中漿液性乳頭狀囊腺瘤15例，黏液性乳頭狀囊腺瘤15例)，卵巢上皮性癌組織70例。卵巢上皮性癌患者年齡19.0～82.0(51.9±13.5)歲，均為初發(fā)病例，術(shù)前均未接受放、化療；組織學(xué)分級：G112例，G221例，G33

7、7例；FIGO分期：Ⅰ期10例，Ⅱ期14例，Ⅲ期43例，Ⅳ期3例；組織學(xué)分型：漿液性癌50例，粘液性癌20例；有淋巴轉(zhuǎn)移者21例，無淋巴轉(zhuǎn)移者49例。標(biāo)本均經(jīng)病理醫(yī)師證實。
　　 2實驗方法：本研究采用免疫組織化學(xué)SP方法檢測HGF、IGF-Ⅰ及MMP-2在卵巢上皮性癌組織、卵巢良性上皮性腫瘤組織及正常卵巢組織中的表達，根據(jù)染色強度及陽性細胞數(shù)量雙評分法半定量積分。HGF蛋白主要表達于卵巢癌組織間質(zhì)細胞及癌細胞的胞漿內(nèi)為棕黃色或

8、棕褐色顆粒，IGF-Ⅰ的陽性染色細胞為細胞漿內(nèi)出現(xiàn)棕黃色顆粒，MMP-2以細胞膜或胞漿出現(xiàn)淡黃至棕黃色顆粒為陽性。采用SPSS13.0軟件包進行統(tǒng)計分析，采用x2檢驗，相關(guān)性分析采用Spearman相關(guān)性檢驗，以α=0.05為檢驗水準(zhǔn)。
　　 結(jié)果：
　　 1免疫組織化學(xué)SP法檢測結(jié)果：HGF表達HGF在卵巢上皮性癌組織、卵巢良性上皮性腫瘤組織及正常卵巢組織中的表達率分別是65.7％、26.7％、15.0％(x2=23.

9、005，P＜0.05)，癌組織中與正常卵巢組織、良性卵巢腫瘤表達有統(tǒng)計學(xué)意義；在卵巢上皮性癌組織中，HGF蛋白的陽性表達在臨床分期Ⅰ-Ⅱ期和Ⅲ-Ⅳ期、有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組織中的表達有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)；在不同年齡組、有無腹水及不同組織學(xué)分級差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。
　　 2免疫組織化學(xué)SP法檢測結(jié)果：IGF-Ⅰ表達在卵巢上皮性癌組織、卵巢良性上皮性腫瘤組織及正常卵巢組織中的表達率分別是77.4％、33.3％、0％(

10、x2=43.622，P＜0.05)，三組兩兩比較有統(tǒng)計學(xué)意義；在卵巢上皮性癌組織中，IGF-Ⅰ蛋白的陽性表達在臨床分期Ⅰ～Ⅱ期和Ⅲ～Ⅳ期、有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的組織中表達差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)；在不同年齡組、不同組織學(xué)分級及有無腹水的表達差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。
　　 3免疫組織化學(xué)SP法檢測結(jié)果：MMP-2表達在卵巢上皮性癌組織、卵巢良性上皮性腫瘤組織及正常卵巢組織中的表達率分別是71.4％、40.0％、0％(x

11、2=33.962，P＜0.05)，三組兩兩比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義；在卵巢上皮性癌組織中，MMP-2蛋白的陽性表達在臨床分期Ⅰ～Ⅱ期和Ⅲ～Ⅳ期、有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的組織中表達差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)；在不同年齡組、不同組織學(xué)分級及有無腹水的表達差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。
　　 4卵巢上皮性癌組織中，HGF與IGF-Ⅰ蛋白的陽性表達水平呈正相關(guān)(r=0.860，P＜0.05)；HGF與MMP-2蛋白的陽性表達水平呈正相關(guān)(