山竹子果殼有效成分的鎮(zhèn)痛作用及機(jī)制研究.pdf

1、山竹子是熱帶常青藤黃屬植物，廣泛分布于東南亞國(guó)家。其果殼中富含口山酮類(lèi)物質(zhì)，本實(shí)驗(yàn)室初期實(shí)驗(yàn)已證明山竹子果殼有效成分提取物(crude extract of mangosteen,CEM)具有鎮(zhèn)痛作用。本文將進(jìn)一步對(duì)CEM的鎮(zhèn)痛機(jī)制及其對(duì)慢性疼痛的作用進(jìn)行探討。
　　 本文共分三個(gè)部分，第一部分研究CEM對(duì)急性疼痛的作用并探討CEM的鎮(zhèn)痛機(jī)制。由于興奮性神經(jīng)元，抑制性神經(jīng)元以及阿片系統(tǒng)均參與痛覺(jué)調(diào)控，在本部分實(shí)驗(yàn)中，我們分別通過(guò)

2、熱板實(shí)驗(yàn)、福爾馬林實(shí)驗(yàn)、扭體實(shí)驗(yàn)來(lái)研究CEM的鎮(zhèn)痛作用與興奮性遞質(zhì)谷氨酸，抑制性遞質(zhì)γ-氨基丁酸(GABA)受體抑制劑荷包牡丹堿和阿片受體抑制劑納絡(luò)酮的關(guān)系。結(jié)果表明100 nmol谷氨酸和0.01μg荷包牡丹堿均能明顯導(dǎo)致痛敏，表現(xiàn)在模型組和對(duì)照組相比，其熱板反應(yīng)的潛伏期明顯縮短，福爾馬林實(shí)驗(yàn)初相和后相的舔腳時(shí)間都明顯增加(P＜0.05)。較之模型組，CEM低，中，高劑量組(劑量分別為0.25，0.5，1.0g/kg)均能明顯增加熱板

3、反應(yīng)的潛伏期，明顯降低福爾馬林實(shí)驗(yàn)兩相的舔腳時(shí)間和醋酸扭體的次數(shù)，CEM中，高劑量組較之模型組有顯著性變化(P＜0.05)。1mg/kg納絡(luò)酮能明顯拮抗陽(yáng)性對(duì)照藥曲馬多的鎮(zhèn)痛作用，但對(duì)于CEM組(劑量分別為0.25，0.5，1.0g/kg)的鎮(zhèn)痛作用無(wú)明顯影響。以上實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明CEM的鎮(zhèn)痛作用與興奮性神經(jīng)遞質(zhì)(谷氨酸)，抑制性神經(jīng)遞質(zhì)(GABA)有關(guān)，阿片受體對(duì)此無(wú)明顯影響。
　　 本論文第二部分建立坐骨神經(jīng)窄縮模型，通過(guò)熱痛閾

4、和機(jī)械痛閾來(lái)檢測(cè)模型大鼠的疼痛行為，并與非甾體類(lèi)鎮(zhèn)痛藥消炎痛，阿片類(lèi)鎮(zhèn)痛藥曲馬多進(jìn)行比較來(lái)研究CEM對(duì)慢性疼痛，尤其是神經(jīng)病理性疼痛的鎮(zhèn)痛作用；并通過(guò)免疫組化實(shí)驗(yàn)檢測(cè)CEM對(duì)于脊髓背角C-Fos蛋白表達(dá)的影響。實(shí)驗(yàn)從手術(shù)后第14天起開(kāi)始給藥，分別于給藥后第1，3，5，7，9天對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的熱痛閾和機(jī)械痛閾進(jìn)行檢測(cè)。結(jié)果表明模型組和對(duì)照組相比，其熱痛閾和機(jī)械痛閾明顯降低(P＜0.05)，說(shuō)明建模成功。CEM劑量組(劑量分別為4，2.0，1.

5、0g/kg)，均能明顯增加CCI大鼠的熱痛閾和機(jī)械痛閾，長(zhǎng)期效果明顯優(yōu)于陽(yáng)性對(duì)照藥消炎痛組(30mg/kg)，曲馬多組(65mg/kg)。此外，C-fos的免疫組化實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，CEM能劑量依賴(lài)性的降低C-fos的表達(dá)，曲馬多組對(duì)C-fos表達(dá)的影響不甚明顯。
　　 實(shí)驗(yàn)第三部分通過(guò)建立連續(xù)11天腹腔注射0.1mg/(kg·d)長(zhǎng)春新堿來(lái)建立癌癥痛模型，通過(guò)熱痛閾和機(jī)械痛閾來(lái)檢測(cè)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的疼痛行為，研究CEM對(duì)癌癥疼痛的抑制作用

6、；并與非甾體類(lèi)鎮(zhèn)痛藥消炎痛，阿片類(lèi)鎮(zhèn)痛藥曲馬多進(jìn)行比較。于建模第3、5、7、9、11天測(cè)大鼠機(jī)械痛閾及熱痛閾。與對(duì)照組相比，模型組老鼠的熱痛閾和機(jī)械痛閾于第5天開(kāi)始出現(xiàn)明顯降低(P＜0.05)，說(shuō)明建模成功。較之模型組，CEM劑量組(劑量分別為4，2.0，1.0g/kg)能明顯提高長(zhǎng)春新堿癌痛模型的熱痛閾和機(jī)械痛閾，且其作用具有劑量依賴(lài)性；非甾體類(lèi)消炎鎮(zhèn)痛藥消炎痛(30mg/kg)在該模型上效果不顯著；阿片類(lèi)鎮(zhèn)痛藥曲馬多(60mg/kg