大連口岸媒介生物抗藥性監(jiān)測及殺蟲劑合理使用研究.pdf

1、研究背景:媒介生物是指直接或間接傳播人類疾病的生物，主要有蚊、蠅、鼠、蚤等八大類。蚊類是重要的媒介生物之一，全世界已知約3000余種。雌蚊刺叮吸血，傳播20余種蟲媒傳染病，如瘧疾、登革熱和登革出血熱、流行性乙型腦炎、黃熱病、絲蟲病等。據(jù)統(tǒng)計(jì)全球每年瘧疾的發(fā)病人數(shù)達(dá)3～5億，死亡人數(shù)約為150～300萬。蠅類全世界已知約7萬余種。蠅類可傳播錐蟲病，并且可以攜帶脊髓灰質(zhì)炎病毒、霍亂弧菌、寄生蟲卵等多種病原體，蠅類的幼蟲還可以寄生在人或脊椎動(dòng)

2、物體內(nèi)而引起蠅蛆癥。目前，隨著擬除蟲菊酯殺蟲劑的大規(guī)模使用，媒介生物對殺蟲劑逐漸產(chǎn)生了抗藥性。自然種群中主要媒介生物如蚊、蠅等對殺蟲劑的抗藥性高達(dá)數(shù)十倍至數(shù)百倍。連續(xù)使用后令殺蟲劑使用劑量不斷加大，濃度不斷提高，自八十年代進(jìn)入中國用于衛(wèi)生害蟲防治，至今在某些地區(qū)的使用濃度已經(jīng)提高1000多倍，該狀況不但增加了殺蟲劑的使用成本，同時(shí)也帶來一系列的生態(tài)問題。因此抗藥性監(jiān)測與殺蟲藥物的合理應(yīng)用，對于媒介生物的防治意義非常重大。
　　目的

3、:本課題研究口岸媒介生物抗藥性監(jiān)測技術(shù)，對口岸地區(qū)媒介生物進(jìn)行快速抗藥性檢測，在此基礎(chǔ)上研究殺蟲劑的合理使用，從而減少用藥的盲目性，降低環(huán)境污染，并將此監(jiān)測技術(shù)與防制方法進(jìn)行推廣，提高口岸地區(qū)媒介生物防治效率。
　　研究方法:本課題采集大連口岸蚊蠅類媒介生物為主要研究對象，通過野外現(xiàn)場采集、實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化養(yǎng)殖、抗藥性生物學(xué)測試和除蟲菊酯殺蟲劑擊倒抗性（等位基因特異性PCR)分子檢測等方法，對大連西山屯、大連灣、藍(lán)天集裝箱場、大窯灣等

4、地區(qū)蚊蠅類媒介生物進(jìn)行快速抗藥性檢測，在此基礎(chǔ)上研究殺蟲劑的合理使用，從而減少用藥的盲目性，降低環(huán)境污染，并將此監(jiān)測技術(shù)與防治方法進(jìn)行推廣，提高口岸地區(qū)媒介生物防治效率。蚊類使用抗藥性生物學(xué)測試方法中的浸漬法進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，通過計(jì)算半數(shù)致死率(LC50)，比較蚊類對幾種殺蟲劑的敏感度，從而找到敏感度相對高的殺蟲劑進(jìn)行蚊類滅殺;蠅類使用抗藥性生物學(xué)測試方法中的掛籠法進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，比較蠅類對幾種殺蟲劑的敏感度，并且檢測家蠅對敵敵畏抗藥性。蚊蠅均使用等

5、位基因特異性PCR進(jìn)行抗藥性分子生物學(xué)檢測，通過計(jì)算突變基因的概率，檢測蚊蠅抗藥性情況。
　　結(jié)果:利用浸漬法對淡色庫蚊及幼蟲進(jìn)行抗藥性毒力測試，結(jié)果大連的3個(gè)地理株對溴氰菊酯敏感度相對較高，對敵敵畏的抗性最高。殘殺威應(yīng)用較多，蚊類產(chǎn)生較明顯的抗藥性，應(yīng)替換使用其他類的殺蟲劑。掛籠法實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，列喜鎮(zhèn)對大連地區(qū)的媒介生物具有較好的殺滅效果，家蠅對其敏感性要高于淡色庫蚊，可以應(yīng)用其殺滅口岸家蠅。應(yīng)用家蠅對敵敵畏抗藥性快速檢測的方法

6、對大連地區(qū)的家蠅進(jìn)行抗藥性檢測，結(jié)果乙酰膽堿脂酶抑制實(shí)驗(yàn)陽性率（包括弱陽性）91.2％，說明大連地區(qū)的家蠅種群對有機(jī)磷殺蟲劑敵敵畏普遍產(chǎn)生抗藥性。在口岸上使用有機(jī)磷類殺蟲劑時(shí)應(yīng)該慎重。建立特異性等位基因PCR方法，檢測不同種群擬除蟲菊酯類殺蟲劑擊倒抗性（kdr)基因頻率，結(jié)果大連地區(qū)三個(gè)地理株的淡色庫蚊各50組樣品，其中藍(lán)天集裝箱場kdr基因頻率為19.0％;西山屯(2009年)kdr基因頻率為19.8％;西山屯(2010年)kdr基因

7、頻率為20.0％;大連灣kdr基因頻率為19.1％。說明大連口岸淡色庫蚊對擬除蟲菊酯類藥物已經(jīng)產(chǎn)生抗藥性，可更換其他藥物進(jìn)行替換擬除蟲菊酯類殺蟲劑。大連的3個(gè)地理株家蠅中，藍(lán)天集裝箱場、大窯灣檢測出kdr抗性雜合子基因型，其kdr基因頻率分別為5％、1％，另外1個(gè)種群未發(fā)現(xiàn)抗性基因，該類藥物可繼續(xù)使用。
　　結(jié)論:通過本項(xiàng)目的各項(xiàng)檢測結(jié)果，提出以下殺蟲劑合理使用措施:大連口岸殺滅淡色庫蚊應(yīng)該采用敏感性較高的幾種擬除蟲菊酯類殺蟲劑輪