Nesfatin-1-NUCB2在犬消化系統(tǒng)上的分布與表達(dá).pdf

1、Nesfatin-1,是一種核組蛋白NUCB2派生前體的神經(jīng)肽,結(jié)構(gòu)上由82個(gè)氨基酸構(gòu)成。NUCB2,作為nesfatin-1的前體,在結(jié)構(gòu)上由含24個(gè)氨基酸的信號(hào)肽和含396個(gè)氨基酸的蛋白構(gòu)成,這些氨基酸序列在不同物種間高度保守(大鼠87.4％與人同源,95.7%與小鼠同源)。NUCB2在激素轉(zhuǎn)化酶(prohormone convertases,PCs)作用下在特定位點(diǎn)裂解產(chǎn)生三個(gè)片段 nesfatin-1(l-82aa)、nesfa

2、tin-2(85-163aa)、nesfatin-3(166-396aa)。其中 nesfatin-1在攝食與能量調(diào)節(jié)上發(fā)揮重要作用。本實(shí)驗(yàn)以犬為研究對(duì)象，探討Nesfatin-1在犬消化系統(tǒng)上的分布與表達(dá)。通過(guò)探究Nesfatin-1在消化系統(tǒng)不同部位的表達(dá)特點(diǎn)，在一定程度上豐富Nesfatin-1調(diào)節(jié)哺乳動(dòng)物攝食及消化的研究?jī)?nèi)容。
　　從市場(chǎng)購(gòu)買(mǎi)不同發(fā)育階段健康中華田園犬，分成四組：幼年期（平均年齡1.5M）3只，初情期前平均

3、年齡4.5M）3只，初情期（7M）3只，成年期（10M）3只。分別取其消化道組織，主要包括食管、胃、十二指腸、空腸、回腸、盲腸、結(jié)腸、直腸、肝臟和胰腺，一部分組織保存在4%多聚甲醛溶液中固定，石蠟切片染色后在光學(xué)顯微鏡下拍照，并采用免疫組化法檢測(cè)Nesfatin-1的分布。另一部分組織樣品則保存在-80 ℃冰箱，采用熒光定量PCR（Real-time fluorescence quantitative PCR，qRT-PCR）測(cè)定NUC

4、B2 mRNA的表達(dá)。
　　結(jié)果表明：Nesfatin-1/NUCB2蛋白主要分布于胃組織的胃底腺上，且細(xì)胞形態(tài)較不規(guī)則（橢圓形、錐狀、三角狀等），與內(nèi)分泌細(xì)胞相似；nesfatin-1/NUCB2蛋白還分布于胰腺組織的胰島區(qū)域特別是胰外分泌部上，且均為強(qiáng)陽(yáng)性。而nesfatin-1/NUCB2蛋白在其它消化組織上均未見(jiàn)表達(dá)。NUCB2 mRNA無(wú)論是在幼兒期、初情期前、初情期還是成年期的食管、胃、十二指腸、空腸、回腸、盲腸、結(jié)腸

5、、直腸和肝臟中含量均無(wú)明顯差異（P＞0.05），而胰腺組織中NUCB2 mRNA含量顯著高于其他組織（P＜0.05）。而同一發(fā)育階段消化組織上NUCB2 mRNA的表達(dá)發(fā)現(xiàn)在胰腺組織上表達(dá)量最高，其次是胃組織，而其他組織表達(dá)量均較低（P<0.05）。而在腸道組織中，初情期前NUCB2 mRNA的含量明顯高于初情期犬（P<0.05）。
　　結(jié)論：Nesfatin-1/NUCB2蛋白主要分布于犬的胃組織的胃底腺、胰島以及胰腺外分泌部；