TUBB3、ERCC1和P-gp在卵巢癌中的表達及其臨床意義.pdf

1、卵巢癌(ovarian cancer,OC)是婦科常見的惡性腫瘤之一,在我國卵巢癌的發(fā)病率有上升趨勢,居婦科腫瘤的第二位[1],同時年齡趨于年輕化。卵巢癌發(fā)病較隱匿,大多數(shù)確診時已屬中晚期,五年生存率雖然逐漸升高,但是至今仍不到50％,可見卵巢癌是嚴重威脅女性健康的重大疾病之一。目前卵巢癌的治療有手術、化療及放療等方法,而化療在治療卵巢癌中占有重要的地位。導致化療失敗并引起患者腫瘤復發(fā)、進展及死亡的主要原因是腫瘤細胞對化療藥物產(chǎn)生的多藥

2、耐藥（multidrug resistance,MDR)。由多種基因、多因素和多步驟的復雜過程產(chǎn)生腫瘤耐藥,而P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)是多藥耐藥基因MDR1編碼產(chǎn)物,產(chǎn)生多藥耐藥性的主要原因是P-gp高表達,而P-gp耐藥機制是在臨床實踐中唯一得到證實的,解決此障礙,腫瘤化療效果將取得突破性進展。治療卵巢癌標準的化療方案是紫杉類聯(lián)合鉑類,部分患者對紫杉類及鉑類藥物不敏感,效果不佳,如果卵巢癌患者對紫杉類、鉑類

3、藥物敏感性好,有利于提高化療有效率和延長患者生存期使之受益。因此探尋對鉑類和紫杉類化療敏感性的預測因子對指導臨床合理用藥非常重要。
　　TUBB3(class III beta-tubulin,β-微管蛋白III型)是細胞骨架的重要組成部分,在多種真核細胞和部分原核細胞中存在,能夠維持細胞形態(tài)結構和參與細胞運動,還在細胞的生長、分裂、凋亡和信息傳導中起著重要作用,而紫杉類藥物可特異性的與β微管蛋白 III結合可阻滯其解聚,阻止有絲

4、分裂的完成,從而引起細胞凋亡達到殺滅腫瘤的作用。有研究表明 TUBB3與紫杉類等抗微管類化療藥物的耐藥密切相關,其高表達可以使紫杉類藥物降低對微管蛋白的解聚,從而導致其耐藥。
　　核苷酸切除修復交叉互補基因1(excision repair cross-complementing group1,ERCC1)具有識別DNA損傷和鏈間切割的功能,是核苷酸剪切修復過程中最關鍵的一個內切酶,其過表達可使腫瘤細胞停滯在 G2/M期,能夠迅速

5、修復損傷的DNA,引起對鉑類藥物耐藥。
　　P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)是ATP依賴性跨膜蛋白,不僅可能量依賴性地將藥物泵出細胞外,還能阻止化療藥物進入到細胞內從而減少細胞內的藥物濃度;此外還可對細胞內的藥物分布發(fā)生改變,把部分藥物都聚集在不能產(chǎn)生自身作用的細胞器中,使藥物達不到療效,從而導致耐藥。
　　目的:
　　通過檢測TUBB3、ERCC1和P-gp在卵巢癌組織及正常卵巢組織中的表達,分析

6、三者分別與卵巢癌患者相關臨床病理因素之間的關系;探討TUBB3、ERCC1和P-gp在卵巢癌中表達的相關性,預測卵巢癌患者對藥物的敏感性及制定個體化治療方案提供依據(jù)。
　　方法:
　　收集手術切除并經(jīng)術后病理確診的卵巢癌組織50例和正常卵巢組織(雙附件無病理情況子宮肌瘤患者的手術切除卵巢為正常對照組)25例病理蠟塊,將篩選出的50例卵巢癌患者的完整病例資料進行整理,術前均未接受化療、放療、生物免疫治療。用免疫組織化學法Env

7、ision兩步法檢測TUBB3、ERCC1、P-gp在卵巢癌組織中的表達,分析其與患者年齡、組織學類型、病理分級、臨床分期、腫瘤發(fā)生部位之間的關系;應用SPSS17.0統(tǒng)計軟件處理數(shù)據(jù),計數(shù)資料采用c2檢驗,相關性采用Spearman相關分析,均以α=0.05作為檢驗標準,P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。
　　結果:
　　免疫組織化學結果
　　1.TUBB3和ERCC1、P-gp在卵巢癌組織和正常卵巢組織中均有表達,T

8、UBB3陽性表達定位于細胞漿,在卵巢癌組織表達陽性率為52.0%(26/50),正常卵巢組織中的陽性率表達為24.0%(6/25),顯著高于正常卵巢組織中表達,差異有統(tǒng)計學意義(c2=7.038,P=0.008);ERCC1陽性表達定位于細胞核,在卵巢癌組織中表達陽性率為70.0%(35/50),正常卵巢組織中的陽性率表達為32.0%(8/25),卵巢癌組顯著高于正常卵巢組,差異有統(tǒng)計學意義(c2=9.420,P=0.002);P-gp

9、定位于細胞質或細胞膜中,在卵巢癌組織表達陽性率為85.0%(42/50),正常卵巢組織中的陽性率表達為40.0%(10/25),卵巢癌組顯著高于正常卵巢組,差異有統(tǒng)計學意義(c2=15.176,P=0.000);
　　2.在蛋白質水平上卵巢癌組織中TUBB3、ERCC1和P-gp的表達與病理分級及臨床分期有關(均P<0.05),其中腫瘤分期越晚三者的表達水平均越高,且在病理分級方面,亦是腫瘤分化程度越低表達水平越高,但三者與患者年

10、齡、組織學類型、發(fā)生部位均無統(tǒng)計學差異(均P>0.05);
　　3.在卵巢癌組織中TUBB3和ERCC1的表達有相關性,且二者呈正相關,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05);TUBB3和P-gp在卵巢癌組織中的表達有相關性,且二者呈負相關,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05);卵巢癌組織中ERCC1的陽性表達率高于P-gp的表達,二者差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05),ERCC1表達與P-gp的表達無明顯相關性。
　　結論:
　

11、　TUBB3、ERCC1和P-gp在卵巢癌組織中有較高的陽性表達率,在正常卵巢組織中低表達,提示三者均可能參與了卵巢癌的發(fā)生、發(fā)展過程,且三者在卵巢癌組織中的表達均與腫瘤病理分級及臨床分期有關,病理分級越低、臨床分期越晚表達的陽性率越高,提示三者與卵巢癌的發(fā)生、發(fā)展及腫瘤耐藥有關;檢測TUBB3和ERCC1在卵巢癌組織中的表達呈正相關;TUBB3和P-gp在卵巢癌組織中的表達呈負相關;ERCC1和P-gp在卵巢癌組織中表達無相關性。由于