電針“神門”對(duì)急性心肌缺血大鼠“G蛋白-PKC”信號(hào)通路影響.pdf

1、目的：利用基因芯片技術(shù)分析電針手少陰心經(jīng)“神門”對(duì)急性心肌缺血的基因表達(dá)譜的影響以及G蛋白、PKC的變化情況，研究其抗急性心肌缺血的作用機(jī)理和與分子基礎(chǔ)。 方法：選擇健康雄性SD大鼠40只，體質(zhì)量220±20g，隨機(jī)分為正常對(duì)照組、模型組、針刺正常心經(jīng)組、針刺模型心經(jīng)組。大鼠在麻醉狀態(tài)下，采用冠狀動(dòng)脈結(jié)扎法復(fù)制急性心肌缺血模型，以標(biāo)準(zhǔn)II導(dǎo)聯(lián)心電圖檢測(cè)，J點(diǎn)抬高、血清CK、LDH升高為模型復(fù)制成功標(biāo)志。選擇1.1mA，2 Hz正

2、負(fù)向交替方波，電針刺激，每5min采樣一次，每天電針30min，連續(xù)3天。在距第一次電針48～50h后，選擇每組符合實(shí)驗(yàn)要求的大鼠，10％水合氯醛（0.36ml/100g）腹腔注射麻醉，取左心室缺血區(qū)心肌組織，勻漿、抽提總RNA、純化、定量，取等量RNA混合，采用Affymetrix提供的大鼠全基因U230A系列基因芯片，按照要求進(jìn)行芯片實(shí)驗(yàn)。用Microarray Suite 信號(hào)處理系統(tǒng)分析基因芯片的雜交信號(hào)，分析不同樣品中的基因表

3、達(dá)，結(jié)合Affymetrix專業(yè)網(wǎng)站數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。 結(jié)果：在Affymetrix公司提供的大鼠U230A全基因芯片15923個(gè)基因和EST中，共篩選出與G蛋白信號(hào)通路相關(guān)基因21個(gè)，與PKC相關(guān)基因27個(gè)。電針心經(jīng)原穴“神門”，可以影響多種G蛋白如Gγ、Gi、G12/13等，和蛋白激酶C如PKCα、ε、η等表達(dá)。 結(jié)論：Gng8、Prkar2b、PKCλ和PKChk2可能是電針“神門”抗急性心肌缺血的特異性分子基