骨肉瘤組織中CD147、MMP-2的表達(dá)和意義.pdf

1、骨肉瘤(osteosarcoma)是一種原發(fā)的、高度惡性的腫瘤,它來源于間葉組織,好發(fā)于20歲以下的青少年男性和兒童,多位于長管狀骨的干骺端,早期易發(fā)生轉(zhuǎn)移,臨床上病死率極高,嚴(yán)重危害青少年健康。在20世紀(jì)70年代以前,放療甚至截肢或是治療骨肉瘤的主要方法,雖然暫時(shí)能在局部控制骨肉瘤的而發(fā)展,但據(jù)統(tǒng)計(jì),經(jīng)過治療后出現(xiàn)遠(yuǎn)離部位的轉(zhuǎn)移的患者高達(dá)80％,綜合生存率僅有20%左右;到了80年代,新輔助化療(neoadjuvantchemothe

2、rpy)概念問世,主張活檢確立骨肉瘤診斷后立即實(shí)行化療方案,同時(shí)依據(jù)腫瘤壞死率指導(dǎo)術(shù)后化療方案;近30年來,隨著新輔助化療的不斷改善和廣泛應(yīng)用,骨肉瘤的5年生存率達(dá)到60%左右?，F(xiàn)在的主要治療觀念是:國內(nèi)外在骨肉瘤的綜合治療中,手術(shù)切除仍是主要治療手段,根據(jù)病情的不同可行保肢手術(shù),同時(shí)輔助有效的化療方案,二者聯(lián)合臨床應(yīng)用能顯著改善骨肉瘤患者預(yù)后。
　　雖然近兩年來手術(shù)切除加輔助化療技術(shù)有不斷的發(fā)展,有效的降低了骨肉瘤的病死率,然而

3、仍然有30﹪左右患者在就診時(shí)甚至在治療的過程中會出現(xiàn)轉(zhuǎn)移或復(fù)發(fā),一旦診斷發(fā)生遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移后,患者的5年生存率只有20-30﹪;腫瘤細(xì)胞對化療藥物產(chǎn)生耐藥性;化療過程中所用的藥物如順鉑、卡鉑、氨甲蝶呤、環(huán)磷酰胺、糖皮質(zhì)激素、紫杉類和長春新堿可引起不同程度的糖耐量異常,甚至誘發(fā)糖尿病,使化療不能如期進(jìn)行,影響患者的治療效果和生存質(zhì)量。這些因素導(dǎo)致在臨床上能夠應(yīng)用的多種手段的治療失敗。人們對骨肉瘤的治療已經(jīng)轉(zhuǎn)到了基因領(lǐng)域,己探索應(yīng)用反義基因、抑癌

4、基因、免疫基因、靶向基因、自殺基因等綜合治療,這種腫瘤基因治療方法很富有發(fā)展前景,成為了目前腫瘤臨床研究的熱門。
　　CD147即細(xì)胞外基質(zhì)金屬蛋白酶誘導(dǎo)因子（extracellular metalloproteinases inducer,EMMPRIN),能刺激腫瘤周圍的纖維母細(xì)胞產(chǎn)生 MMPs,為腫瘤的侵潤與轉(zhuǎn)移創(chuàng)造有利條件,它是一種細(xì)胞表面粘附分子,目前有研究發(fā)現(xiàn) CD147與腫瘤血管形成有密切的關(guān)系,認(rèn)為CD147可促進(jìn)

5、腫瘤血管形成,為腫瘤細(xì)胞的增殖和轉(zhuǎn)移創(chuàng)造條件。有研究發(fā)現(xiàn)CD147和MMP-2在多種惡性腫瘤組織中表達(dá)率增高,與腫瘤轉(zhuǎn)移與浸潤關(guān)系密切,并在血管的形成過程中發(fā)揮著一定作用,與腫瘤的病理分期和預(yù)后密切相關(guān)。
　　目的:
　　本研究通過測定 CD147和MMP-2在骨肉瘤組織中的表達(dá),以探討二者在骨肉瘤發(fā)生、侵襲及轉(zhuǎn)移中作用,并分析二者間的相互聯(lián)系,以確定共同檢測 CD147及 MMP-2是否成為判斷骨肉瘤預(yù)后的新指標(biāo)。

6、　　方法:
　　標(biāo)本的采集和處理:
　　收集2003年l月-2013年5月,承德醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院、保定市第二醫(yī)院、河北醫(yī)科大學(xué)第三醫(yī)院手術(shù)切除的骨肉瘤標(biāo)本37例,骨軟骨瘤標(biāo)本10例,均經(jīng)兩位臨床病理醫(yī)師驗(yàn)證。所收集組織用4%的中性甲醛浸泡,清水沖洗,100%,90%,75%的梯度酒精脫水,二甲苯透明,石蠟包埋。連續(xù)石蠟切片,厚度為0.5um。
　　分組:
　　將收集得得組織標(biāo)本分為骨肉瘤組(37例)、骨軟骨瘤組(1

7、0例);將骨肉瘤組按照性別分為男(20)、女(17)兩組,按照組織分型分為骨母細(xì)胞型(17)、纖維母細(xì)胞型(7)、軟骨母細(xì)胞型(9)、其他(4);按照Enneking外科分期法分為Ⅰ期(4)、Ⅱa期(7)、Ⅱb期(14)、Ⅲ期(12),按照有無肺轉(zhuǎn)移分為兩組:有肺轉(zhuǎn)移組(23),無肺轉(zhuǎn)移組(14)。
　　實(shí)驗(yàn)方法:
　　應(yīng)用免疫組織化學(xué)S-P法,分別檢測37例骨肉瘤組織、10例骨軟骨瘤組織進(jìn)行免疫標(biāo)記,對兩組中 CD147及

8、 MMP-2的表達(dá)情況進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。
　　鏡下結(jié)果評價(jià):
　　每個(gè)切片隨機(jī)挑選5個(gè)視野,將免疫組化結(jié)果根據(jù)染色程度及陽性細(xì)胞百分?jǐn)?shù)進(jìn)行評分,以染色程度得分和陽性細(xì)胞百分?jǐn)?shù)得分的乘積計(jì)算總分。
　　統(tǒng)計(jì)學(xué)分析:
　　應(yīng)用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)處理,樣本率的比較采用卡方檢驗(yàn),P<0.05說明差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。MMP-2、CD147之間的相關(guān)性采用Spearman檢驗(yàn),P<0.05說明差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

9、r>　　結(jié)果:
　　1.免疫組化結(jié)果顯示:CD147、MMP-2陽性產(chǎn)物位于骨肉瘤細(xì)胞的胞膜和胞漿,為棕黃色顆粒樣物,間質(zhì)及正常組織中無或有少量著色。CD147在骨肉瘤中的陽性表達(dá)率高達(dá)89.2%,而對照組的骨軟骨瘤的陽性率為0,差異具有顯著性,(P<0.01)。MMP-2在骨肉瘤中的陽性表達(dá)率達(dá)78.4%,而對照組的骨軟骨瘤的陽性率僅為20%,兩者相比差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,(P<0.05)。
　　2.CD147、MMP-2在

10、骨肉瘤細(xì)胞中的陽性表達(dá)與年齡、性別和Dahlin組織分型無關(guān)(P>0.05)。二者的陽性表達(dá)與骨肉瘤Enneking臨床分期和有無肺轉(zhuǎn)移有關(guān)（P<0.01):隨骨肉瘤臨床分期的增加,CD147及MMP-2的陽性表達(dá)率也逐漸升高;有肺轉(zhuǎn)移組CD147和MMP-2的陽性表達(dá)明顯高于無肺轉(zhuǎn)移組。
　　3.骨肉瘤中,CD147與 MMP-2的表達(dá)有一定的相關(guān)性,呈正相關(guān)(r=0.451,P<0.01)。
　　結(jié)論:
　　1.骨

11、軟骨瘤中基本不表達(dá)CD147,骨肉瘤組中的CD147、MMP-2陽性表達(dá)率顯著高于骨軟骨瘤組,并且隨著腫瘤Enneking臨床分期的增高,CD147及 MMP-2的陽性表達(dá)水平也升高;且有肺轉(zhuǎn)移組的骨肉瘤患者CD147、MMP-2的陽性表達(dá)率明顯高于無肺轉(zhuǎn)移組的,說明二者的表達(dá)與骨肉瘤的轉(zhuǎn)移和惡性程度有關(guān)。
　　2.骨肉瘤中CD147和MMP-2的表達(dá)呈正相關(guān),二者的強(qiáng)陽性均與腫瘤的轉(zhuǎn)移率高密切相關(guān),預(yù)后較差,提示二者在腫瘤的發(fā)生