血管緊張素Ⅱ通過氧化應(yīng)激途徑對大鼠胰島β細胞的影響.pdf

1、目的：首先探討血管緊張素Ⅱ的不同濃度及作用不同時間對胰島β細胞的影響。進一步研究血管緊張素Ⅱ與大鼠胰島β細胞凋亡之間的關(guān)系，及血管緊張素Ⅱ受體阻斷劑是否對胰島細胞具有保護作用。
　　方法：一、將體外環(huán)境培養(yǎng)的RIN-m細胞隨機分為5組：（1）正常對照組（培養(yǎng)基中不含AngⅡ）；（2）AngⅡ0.1μmol·L-1組；（3）AngⅡ1.0μmol·L-1組；（4）AngⅡ10.0μmol·L-1組；（5）調(diào)零組。各組分別培養(yǎng)24h、

2、48h、72h后，應(yīng)用MTT比色法檢測不同濃度AngⅡ及作用不同時間的細胞增值活性；二、將體外培養(yǎng)的RIN-m細胞隨機分為3組：（1）正常對照組；（2）AngⅡ10μmol·L-1組；（3）AngⅡ抑制劑（氯沙坦）預(yù)處理組。培養(yǎng)72h后收集細胞，流式細胞術(shù)測定細胞凋亡情況；活性氧檢測試劑盒測定細胞內(nèi)ROS的水平；采用real-time－PCR測定細胞NF-KBp65mRNA的表達水平，western-blot測定NF-KBp65和p-P

3、38MAPK蛋白質(zhì)的表達情況。
　　結(jié)果：
　　1.不同濃度的AngⅡ及不同作用時間的增殖率比較：同一時間，隨著AngⅡ濃度的增加，胰島細胞的增殖率降低（P＜0.05)；同一濃度，隨著時間的增加，胰島β細胞的增殖率降低(P＜0.05)。
　　2.AngⅡ與胰島細胞凋亡的關(guān)系：與正常組相比，AngⅡ組細胞凋亡率和ROS含量增加(P＜0.05)；與AngⅡ組相比，AngⅡ抑制劑組細胞凋亡率和ROS含量減少(P＜0.05)。

4、
　　3.AngⅡ誘導(dǎo)胰島細胞凋亡的機制：與正常組相比，AngⅡ組細胞NF-KBp65mRNA表達和NF-KBp65、p-P38MAPK蛋白表達增加(P＜0.05)；與AngⅡ組相比，AngⅡ抑制劑組細胞NF-KBp65mRNA表達和NF-KBp65、p-P38MAPK蛋白表達降低(P＜0.05)。
　　結(jié)論：
　　1.隨著AngⅡ濃度及時間的增加，胰島β細胞的增殖率降低。
　　2.AngⅡ通過誘導(dǎo)胰島β細胞內(nèi)R