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1、本文以A類動(dòng)物烈性傳染病之首的口蹄疫病毒(foot-and-mouthdiseasevirus,F(xiàn)MDV)為模型,進(jìn)行金絲桃素新制劑抗RNA病毒的生物試驗(yàn)研究。通過(guò)體外試驗(yàn)、動(dòng)物試驗(yàn)及對(duì)小鼠脾淋巴細(xì)胞增殖試驗(yàn),探索性的研究金絲桃素新制劑在重大疫病防治方面的作用。另外,進(jìn)行了金絲桃素化學(xué)合成的部分研究。具體研究如下: (一)金絲桃素新制劑抗口蹄疫病毒的生物試驗(yàn)研究。 1.體外抗口蹄疫病毒試驗(yàn)。本試驗(yàn)分別通過(guò)對(duì)金絲桃素新制劑
2、在BHK-21細(xì)胞和3~4日齡乳鼠中,同利巴韋林和莪術(shù)油進(jìn)行抗口蹄疫病毒的療效比較,確定金絲桃素新制劑的抗病毒效果。結(jié)果表明:金絲桃素新制劑具有很好的抗病毒效果。在BHK-21細(xì)胞中,金絲桃素新制劑可以使TCID50從6.22下降到3.22;在乳鼠中,金絲桃素新制劑在25mg.mL-1的濃度下,可分別使OZ和AsiaI型的FMDV分別下降3~4個(gè)滴度,同對(duì)照藥物相比表現(xiàn)出良好的抗病毒作用,差異顯著(P<0.05)。 2.體內(nèi)抗口
3、蹄疫病毒試驗(yàn)。本試驗(yàn)將四頭經(jīng)過(guò)檢測(cè)無(wú)感染、無(wú)免疫的健康牛隨機(jī)分成兩組,用藥組3頭,對(duì)照組1頭。分別舌面攻毒10000ID50。攻毒同時(shí),按照15g.Kg-1給小牛灌服金絲桃素粗品,每天一次持續(xù)七天。臨床癥狀結(jié)果顯示:用藥組只有一頭輕微發(fā)病,對(duì)照組發(fā)病嚴(yán)重。液相阻斷ELISA檢測(cè)抗體滴度顯示:用藥組抗體滴度產(chǎn)生晚于對(duì)照組,且抗體水平相對(duì)較低。說(shuō)明金絲桃素可能對(duì)病毒吸附宿主細(xì)胞、病毒自身復(fù)制或機(jī)體免疫等一種或幾種途徑有影響。 3.淋
4、巴細(xì)胞增殖試驗(yàn)。本試驗(yàn)研究了金絲桃素新制劑對(duì)小鼠脾臟淋巴細(xì)胞增殖的影響。結(jié)果發(fā)現(xiàn)金絲桃素新制劑從50μg.mL-1開(kāi)始至800μg.mL-1六個(gè)濃度均可使小鼠脾臟淋巴細(xì)胞顯著增加(P<0.01),且具有明顯的劑量依賴關(guān)系,可以間接推測(cè)金絲桃素新制劑具有一定提高免疫力的功能。 (二)金絲桃素(Hypericin,HY)的化學(xué)合成。本研究綜合國(guó)內(nèi)外的文獻(xiàn)資料,對(duì)其化學(xué)對(duì)照品合成路線進(jìn)行了探索,將一些合成工藝進(jìn)行了必要的改進(jìn),利用1,
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