在支氣管哮喘發(fā)病中磷酸二酯酶4活性和表達的變化及選擇性磷酸二酯酶4抑制劑的影響.pdf

1、本文采用卵白蛋白致敏雄性SD大鼠,經(jīng)抗原反復(fù)攻擊制備大鼠的哮喘模型,確證致敏后反復(fù)抗原攻擊是否引起cAMP-PDE活性的升高,從細胞和分子水平分析其活性升高的機理.同時比較了選擇性PDE4抑制劑piclamilast和其"me-too"的新藥ciclamilast 的治療作用.主要內(nèi)容如下:1、致敏大鼠抗原攻擊引起肺泡灌洗液(BALF)中炎癥細胞聚集及抗炎藥物的影響2、致敏大鼠抗原攻擊引起肺組織勻漿PDE活性變化及抗炎藥物的影響3、致敏

2、大鼠抗原攻擊引起肺功能的變化及抗炎藥物的影響4、致敏大鼠抗原攻擊引起肺組織IL-4含量的變化及抗炎藥的影響5、致敏大鼠抗原攻擊引起肺組織病理學(xué)改變的關(guān)系及抗炎藥物的影響6、致敏大鼠抗原攻擊引起肺組織勻漿cAMP-PDE活性與有關(guān)指標的相關(guān)性分析6、致敏大鼠抗原攻擊引起肺組織勻漿PDE活性升高的組成分析7、致敏大鼠抗原攻擊引起肺組織中PDE4亞型免疫組化的分布、PDE4亞型蛋白表達及抗炎藥物的影響8、致敏大鼠抗原攻擊引起肺組織PDE4亞型

3、mRNA表達的變化及抗炎藥物的影響9、致敏大鼠抗原攻擊引起離體氣管收縮和舒張功能的變化10、PDEA抑制劑對大鼠嘔吐相關(guān)反應(yīng)的影響結(jié)論本研究進一步證實致敏大鼠抗原攻擊后引起cAMP-PDE活性升高,并且以PDE4活性增高為主.也首次在蛋白水平和mRNA水平證明了PDE4亞型蛋白的表達明顯增強,和mRNA表達明顯增加,與其活性的上升一致,首次解釋了其活性上升的基礎(chǔ).而由于PDE4活性的增強,導(dǎo)致致敏后重復(fù)抗原攻擊大鼠的氣管平滑肌功能發(fā)生了

4、變化,對Mch的反應(yīng)增強,而對沙丁胺醇松弛氣管平滑肌的反應(yīng)性下降.同時,我們也發(fā)現(xiàn)肺組織勻漿cAMP-PDE活性與BALF中的嗜酸性粒細胞數(shù)目、病理切片中的炎癥細胞總評分及肺組織勻漿IL-4含量存在明顯的相關(guān)性,而與cGMP-PDE活性之間無相關(guān)性.因此,cAMP-PDE活性可能是疾病發(fā)生發(fā)展過程中的一個標志.PDE4抑制劑Piclamilast、ciclamilast、rolipram均能明顯抑制抗原致敏攻擊引起的肺部炎癥.Rolip