睪丸特異蛋白激酶TSSK4的基因克隆及功能初探.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、本文通過EST同源篩選的方法，用TSSK(testis-specific serine/threonine kinase)1，2，3的cDNA為信息探針在GenBank數(shù)據(jù)庫中發(fā)現(xiàn)了一個(gè)新的同源基因，在人的睪丸組織cDNA文庫中將其克隆，該cDNA序列包含了984個(gè)堿基的開放閱讀框，編碼一個(gè)328個(gè)氨基酸的蛋白質(zhì)。該蛋白質(zhì)具有一個(gè)保守的絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶結(jié)構(gòu)域，氨基酸序列比較顯示這個(gè)新的推導(dǎo)蛋白與TSSK1，TSSK2，TSSK3有

2、較高的同源性，可能是這個(gè)亞家族的第四個(gè)成員，故命名為TSSK4。同樣的方法獲得小鼠的同源基因tssk4。組織表達(dá)譜分析表明TSSK4也只在睪丸組織中表達(dá)，免疫組化定位分析表明tssk4主要在小鼠睪丸中的單倍體的圓形精子細(xì)胞中表達(dá)。 為了研究TSSK4的生理功能，選擇以酵母雙雜交的方法篩選互作蛋白作為切入點(diǎn)，從人的睪丸cDNA文庫中篩選到了一個(gè)能與TSSK4互作的蛋白——cAMP應(yīng)答元件結(jié)合蛋白CREB。體外GST pull-do

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